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（二）、除雜及抗體哺育。8、超聲破碎結束后，10，000g4oC離心10min。去除不溶物質。留取300ul做實驗，其余保存于-80oC。300ul中，100ul加抗體做為實驗組；100ul不加抗體做為對照組；100ul加入4ul5MNaCl（NaCl終濃度為0.2M），65oC處理3h解交聯，跑電泳，檢測超聲破碎的效果。9、在100ul的超聲破碎產物中，加入900ulChIPDilutionBuffer和20ul的50×PIC。再各加入60ulProteinAAgarose/SalmonSpe
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熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization,FISH）（圖）
實驗原理熒光原位雜交（FluorescenceinsituhybridizationFISH）是一門新興的分子細胞遺傳學技術，是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變異分析、病毒感染分析、人類產前診斷、腫瘤遺傳學和基因組進化研究待許多領域。FISH的基本原理是用已知的標記單鏈核酸為探針，按照堿基互補的原則，與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合，形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DN -
1.探針的標記：（1）如下設置探針標記的反應體系：待標記探針（1.75pmol/微升）2微升T4PolynucleotideKinaseBuffer（10X）1微升Nuclease-FreeWater5微升[γ-32P]ATP（3,000Ci/mmolat10mCi/ml）1微升T4PolynucleotideKinase（5-10U/微升）1微升總體積10微升按照上述反應體系依次加入各種試劑，加入同位素后，Vortex混勻，再加入T4PolynucleotideKinase，混勻。（2）使用水
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一、原理質粒DNA粘附在細菌細胞表面，經過42°C短時間的熱擊處理，促進吸收DNA.然后在非選擇培養基中培養一代，待質粒上所帶的抗菌素基因表達，就可以在含抗菌素的培養基中生長。二、器材旋渦混合器，微量移液取樣器，移液器吸頭，1.5ml微量離心管，雙面微量離心管架，干式恒溫氣浴（或恒溫水浴鍋），制冰機，恒溫搖床，培養皿（已鋪好固體LB-Amp），超凈工作臺，酒精燈，玻璃涂棒，恒溫培養箱。三、試劑培養基（不加抗菌素），LB培養基（加抗菌素），無菌ddH2O,IPTG,X-gal.四、實驗準備無菌dd
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一、實驗目的與原理質粒多為一些雙鏈、環狀的DNA分子，是獨立于細菌染色體之外進行復制和遺傳的輔助性遺傳單位。質粒是進行分子生物學實驗操作，進行遺傳工程改良物種等工作時zui主要的DNA載體。提取質粒的基本步驟分為三步：①細菌的培養和質粒的擴增②細菌菌體的裂解③質粒DNA的純化本實驗采取的菌體裂解方法為堿解法，質粒純化方法為梯度離心法。二、材料與試劑1、材料：大腸桿菌2、儀器：超凈工作臺，培養箱，搖床，恒溫水浴鍋，臺式離心機，取液器一套，低溫冰箱，冷凍真空干燥機，電泳儀，水平電泳槽，紫外觀測儀3、
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1主題內容與適用范圍本文規定了食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌檢驗方法。本文適用于航空食品的檢驗。2設備和材料吸管（1ml、10ml）、恒溫培養箱（36±1℃、44.5±0.5℃）、冰箱、均質器、振蕩器、平皿、稀釋瓶、天平、顯微鏡等3培養基和試劑月桂基硫酸鹽胰蛋白月示（LST）肉湯、煌綠乳糖膽鹽（BGLB）肉湯、EC肉湯、伊紅美藍瓊脂（EMB）、營養瓊脂斜面、色氨酸肉湯、MR-PV培養基、Korser氏枸掾酸鹽肉湯、結晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）、Butterfield氏磷酸鹽緩沖稀釋液、
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嚴格的消毒滅菌對細胞與胚胎工程研究與應用工作極為重要，直接影響著整個實驗能否順利進行。（一）消毒滅菌方法目前常用的消毒滅菌方法多采用物理方法（如干熱滅菌法、濕熱滅菌法、過濾除菌法、射線殺菌法等）和化學方法（消毒劑、抗生素）兩大類。1．干熱滅菌法是利用恒溫干燥箱內120oC～150oC的高熱，并保持90～120分鐘，殺死細菌和芽孢，達到滅菌目的的一種方法。主要適用于不便在壓力蒸汽滅菌器中進行滅菌，且不易被高溫損壞的玻璃器皿、金屬器械以及不能和蒸汽接觸的物品的滅菌。用此方法滅菌的物品干燥，易于貯存。
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實驗試劑BacteriumpreparationCryoprotectiveagentTrueCoolTMcryovial實驗設備CoolBoxTMCFT30ice-freecoolingstationCoolRack®CFT30CoolRack®CFCryolabelsand/orcryomarkersThermalTrayHPplatform（optional）CoolSinkTMBX50（optional）37°Cwaterbath-80°CFreezer實驗步驟1.BacteriaPre
