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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 20401ES60 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 生物產業,制藥 |
產品介紹
rEK重組腸激酶 Recombinant Enterokinase
產品描述
rEK重組腸激酶 Recombinant Enterokinase是高純度的牛腸激酶輕鏈亞基，它有著和天然提取的腸激酶同樣特異的切割酶活性，切割位點Asp-Asp-Asp-Asp-Lys，可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合標簽，本rEK具有比天然酶更高的切割活性。
本品為采用重組大腸桿菌分泌表達的高純度、高活性、高特異的牛腸激酶，適用范圍廣，并且在各種去垢劑和變性劑存在的條件下仍具有部分活性。本品不含標簽，由于具有酶切活性，酶切反應使用量少，不影響下游蛋白應用，故后續不需將其去除。
產品組分
編號 | 組分 | 產品編號/規格 | ||||
20401ES60 | 20401ES70 | 20401ES76 | 20401ES80 | 20401ES90 | ||
20401 | rEK重組腸激酶 | 100 U | 200 U | 500 U | 1000 U | 5000 U |
運輸和保存方法
冰袋運輸。試劑盒內各組分-20°C保存兩年，盡量避免反復凍融（5次以內沒問題）。
基本特性
來源（Source） | E.Coli |
分子量（Molecular Weight） | 理論值25.850 kDa |
外觀（Appearance） | 無菌液體 |
酶濃度（Enzyme Concentration） | ≥5 U/uL |
活性定義（Activity Definition） | 一個活性單位定義為25°C，12-16 h，在25 mM Tris-HCl，Ph 8.0緩沖體系下，將500 μg帶有腸激酶酶切位點的融合蛋白切開95%所需要的酶量 |
內毒素檢測（Endotoxin） | 用LAL法測定內毒素含量小于1 EU/μg |
質量保證（Quality assurance） | 經多次柱純化，SDS-PAGE膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶；本制品中不含有非特異性的蛋白酶切活性 |
常見影響腸激酶活性的因素（Influence factors） | >2 M尿素，>200 mM NaCl，>20 mM β-ME，>0.1%SDS，>50 mM咪唑，或>5%甘油 |
應用舉例
【注】該酶效力高且待切蛋白結構性質不同，建議先進行預實驗摸索酶使用濃度及酶切反應時間。
1）反應體系
融合蛋白 | 0.05-0.1 mg（蛋白濃度：0.1-1 mg/mL） |
Enterokinase | 0.1-0.2 U |
緩沖體系 | 25 mM Tris-HCL 8.0 |
注：緩沖液的使用體積等比例融合蛋白和酶使用量的總和。
2）反應條件：25°C過夜酶切（注：酶切需要16-24 h）。
【注】重組腸激酶可使用25 mM Tris-HCl pH 8.0稀釋成每1 μL含0.1單位的溶液使用。
反應條件：4°C低溫酶切條件，酶切需要48-64 h 或者增加2-3倍酶量。
注意事項
1）本產品所講述的緩沖體系需要自行配置。
2）在＞200mM咪唑，或＞200mM NaCl，或＞5%甘油，酶切會受到影響。如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種，為獲得理想的酶切結果，請先將樣品透析到25 mM Tris-HCl 8.0緩沖液中，然后再進行酶切實驗；若不方便透析，可將樣品稀釋，使得各組分低于干擾濃度后再酶切，酶的用量與蛋白比例不變；若干擾因素很多，且不便去除，需要適當增加酶量或延長酶切時間，有助于得到理想的酶切效果。
3）磷酸鹽對Enterokinase有很強的抑制作用，痕量的磷酸鹽都會嚴重影響Enterokinase的活性，因此在酶切體系內不能存在磷酸鹽。
4）本品是具有高酶活力重組腸激酶，切割蛋白使用量少，可不考慮除去。
5）蛋白酶切效果不好，可適當增加酶量，或適當延長酶切時間。
6）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
貨號 | 名稱 | 產地 | 規格 | 報價 | *（元） | 庫存 |
30307ES10 | 重組腸激酶 Recombinant Enterokinase | YEASEN | 100U | 200 | 180 | 是 |
30307ES20 | 重組腸激酶 Recombinant Enterokinase | YEASEN | 200U | 350 | 320 | 是 |
30307ES50 | 重組腸激酶 Recombinant Enterokinase | YEASEN | 500ul | 700 | 650 | 是 |
30307ES60 | 重組腸激酶 Recombinant Enterokinase | YEASEN | 1000U | 1200 | 1120 | 是 |
30307ES92 | 重組腸激酶 Recombinant Enterokinase | YEASEN | 5000U | 5000 | 4680 | 一周內 |
