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實驗原理細胞質膜是由蛋白質不同程度鑲嵌在脂雙層中所形成的動態流動結構,蛋白質和脂類分子又與寡糖鏈結合為糖蛋白和糖脂分子,糖蛋白和糖脂分子伸至細胞表面的分枝狀寡糖鏈在質膜表面形成細胞外被(又稱為糖萼)。許多研究結果表明:細胞間的分子識別、細胞的生長和分化、免疫反應和腫瘤發生等均與細胞外被(分枝狀寡糖鏈)有關。凝集素(lectin)是一類含糖的(少數凝集素例外)并能與糖進行專一性結合的蛋白質,它具有凝集細胞和刺激細胞分裂的作用。凝集素促使細胞凝集主要是由于它能與細胞外被的糖分子相連接、在細胞間形成“
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實驗原理染色方法:革蘭染色法是細菌學中zui廣泛使用的一種鑒別染色法。1884年由丹麥醫師Gram創立。方法是先將細菌用結晶紫染色,加媒染劑(增加染料和細胞的親和力)后,用脫色劑(酒精或丙酮)脫色,再用復染劑染色。如果細菌不被脫色而保存原染液顏色者為革蘭陽性菌(G+);如被脫色,而染上復染液的顏色者為革蘭陰性菌(G-)。此染色法可將所有具有細胞壁的細菌分為兩大類:革蘭陽性菌和革蘭陰性菌。單染色法:只能觀察微生物的大小、形狀、和細胞排列狀況,但不能鑒別微生物以及它的特殊構造等。復染色法:用兩種或兩
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實驗試劑液氮,干冰,1%明膠,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀釋抗體,辣根過氧化物酶標記的二抗,DAB/金屬鹽試劑,3%過氧化氫,0.3%(W/V)氯化鎳貯存液,Harris蘇木精,乙醇實驗設備載玻片,Whatman1#濾紙,低倍光學顯微鏡實驗材料未受損傷的組織實驗步驟1.將未受損傷的組織切剖成小樣本,約lcmXIcmX0.4cm。2.將標本放在卡片的一端。標記該卡片,將帶有標本的一端浸入液氮中。60s后,取出標本并放在干冰上。修剪卡片,使其大小剛好比組織塊稍
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實驗原理線粒體是細胞內一種重要細胞器,是細胞進行呼吸作用的場所。細胞的各項活動所需要的能量,主要是通過線粒體呼吸作用來提供的。活體染色是應用無毒或毒性較小的染色劑真實地顯示活細胞內某些結構而又很少影響細胞生命活動的一種染色方法。詹納斯綠B是線垃體的專一性活體染色劑。線粒體中細胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態呈藍綠色,而在周圍的細胞質中染料被還原,成為無色狀態。實驗試劑1.l/300詹納斯綠B染液2.Ringer氏液(哺乳類用)實驗設備1.顯微鏡2.手術器材一套3.解剖盤4.小平皿5.載片6.蓋片7
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實驗試劑膠原酶V,512kut/mg(Sigma公司),DNA酶(Sigma公司),胎牛血清(Gibco公司),RPMI1640培養液(Gibco公司),Dextran(Pharmacia公司),Hanks平衡鹽溶液(Gibco公司)。實驗設備離心機,注射器,顯微鏡,超凈工作臺等。實驗材料成年雜種豬,豬齡12mo,體質量150kg左右,豬被屠宰放血后,在相對無菌條件下迅速取出胰腺,保存于4℃Hanks液中送至實驗室,熱缺血時間少于10min,冷缺血時間少于90min。實驗步驟1.胰島分離胰腺取回
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實驗步驟1.所有容器高溫滅菌兩次,DEPC高溫滅菌,所有的試劑用DEPC配制,高溫滅菌。2.在一滅菌2mL管中加入:5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0)0.1mL。3.稱取0.2g小麥黃化苗的葉片,迅速在液氮中研磨成粉末,轉入已準備好的離心管中,劇烈震蕩。4.混勻,冰浴30min。5.4℃,12000rpm,10min。6.上清至另一離心管中加0.4mL氯仿,劇烈震蕩。冰浴放置5min。7.4℃,12000rpm,10min。8.棄有機相(下層)加入0.4mL
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實驗步驟1.克隆胚胎制備和胚胎培養卵母細胞在含有5.5mM葡萄糖的CZB培養液中培養。用含有5.5mM葡萄糖和2.5ug/ml細胞松弛素B的HEPES-CZB液(HCZB)作為工作液,卵母細胞在此液中被去掉紡錘體-染色體復合體;用卵丘細胞作為核供體。用注射針反復吸入、吹出卵丘細胞,以除去其細胞膜和大部分細胞質,然后用注射針將裸卵的核注入去除紡錘體-染色體復合體的卵母細胞中。孤雌胚胎所用的卵母細胞與用于制備核移植胚胎的卵母細胞來源相同。孤雌胚胎和核移植胚胎用不含Ca2、卻含10mMSr2和細胞松弛
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實驗試劑HBSS:NaCl8g/LKCl400mg/LKH2PO460mg/L無水Na2PO447.86mg/L無水葡萄糖1000mg/LNaHCO3350mg/L實驗材料妊娠期BALB/c小鼠實驗步驟1.將1~2天齡新生裸鼠窒息后,置于培養皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠,流水*沖洗,然后用70%乙醇洗兩次。小鼠應立即使用,若待處理的小鼠數量較多,可置冰上30min。2.去除小鼠的四肢和尾巴。3.將小鼠從尾巴至鼻子的皮膚作一簡單切口,用大鼠牙齒鑷輕輕將整個身體的皮膚剝下,用一把鑷子夾住身