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北京西美杰科技有限公司

主營產品: 生物學檢測試劑盒,化學試劑,蛋白質氧化損傷,抗原抗體

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RevIT™ AAV Enhancer提高AAV產量的利器
RevIT™ AAV Enhancer提高AAV產量的利器
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  • 型號
  • 品牌 Mirus Bio/美國
  • 廠商性質 代理商
  • 所在地 北京市

更新時間:2023-08-25 17:23:19瀏覽次數:540

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【簡單介紹】
供貨周期 現貨 應用領域 生物產業,農業,制藥
RevIT™ AAV Enhancer提高AAV產量的利器,西美杰代理的Mirus品牌新品上市 RevIT™ AAV Enhancer, 提高AAV產量的又一利器!可搭配Mirus TransIT-VirusGEN® GMP 轉染試劑或其他品牌轉染試劑 (如PEI等)

腺相關病毒 (AAV) 是基因治療中使用廣泛的傳遞機制。近年來,基于AAV病毒開發的基因療法的研發及臨床試驗注冊項目數量呈指數級增長,截至目前,美國FDA已批準五項AAV療法,同時,用于基因治療的AAV也是全球市場上最為昂貴的藥物之一,其中售價最高的Hemgenix®,每劑價格約為350萬美元。由于該療法每劑量可能需要1011-1016載量的AAV病毒,如何實現高效的AAV生產,已成為工藝流程優化中的重要一環。

西美杰代理的Mirus成立于1996年,在核酸遞送領域深耕多年,TransIT-VirusGEN® GMP 轉染試劑支持AAV及慢病毒(LV)從科研到GMP商業級別生產。不同于傳統基于單組分的轉染試劑(如陽離子聚合物聚乙烯亞胺,PEI),Mirus將多聚物及脂質技術進行多重組合,針對不同細胞類型,不同應用場景,有著不同轉染方案。

Mirus遞轉平臺Polymers + Lipids的多重、多功能組合


RevIT™ AAV Enhancer提高AAV產量的利器


   在病毒生產工藝方面,除了需要
克服細胞遞轉過程中的多重阻礙,以實現更高效轉染和更低細胞毒性;增強子的加入,還可大幅度提升多種血清型AAV病毒生產載量。但Mirus并沒有止步于此,為了進一步提高下游生產中的AAV產量, 今年七月底西美杰代理的Mirus發布用于AAV生產的
RevIT™ AAV Enhancer,可搭配Mirus TransIT-VirusGEN® GMP 轉染試劑或其他品牌轉染試劑 (如PEI等)。基于HEK293懸浮細胞數據,相對于老版本AAV增強子,RevIT™ AAV Enhancer可將AAV基因組滴度提高1.2-4.9倍,并且使用更便捷,非常容易整合入現有的AAV生產工藝流程中。Mirus RevIT™ AAV Enhancer的推出,使得AAV上游生產成本進一步降低成為可能,進而降低基因治療藥物單劑量成本。

 

RevIT™ AAV Enhancer

 

 

RevIT™ AAV Enhancer:可以將AAV基因組滴度提升1.2-4.9倍


實驗結果顯示,平行對比Mirus TransIT-VirusGEN®搭配老版本AAV增強子(VirusGen + Enh 1.0)和新版本RevIT™ AAV Enhancer (VirusGen + RevIT),針對AAV2、AAV8、AAV9不同血清型,基因組滴度分別有著1.6、4.9以及1.2倍提升。除此之外,在測試的所有血清型中,使用RevIT™ AAV Enhancer也在不同程度上收獲了更高比例的實心率 (圖1)。該結果表明,在搭配Mirus TransIT-VirusGEN®轉染試劑時,新版本增強劑RevIT™ AAV Enhancer可顯著提高AAV基因組滴度(GC/mL)及實心率(%Full Capsids)。

RevIT Transfection VirusGEN

圖1 . 相比Mirus老版本增強子,加入RevIT™ AAV Enhancer后,可將AAV基因組拷貝數提升1.2-4.9倍,同時改善AAV病毒實心率。

 

RevIT™ AAV Enhancer具有廣泛適配性,搭配其他品牌轉染試劑(如PEI),AAV病毒基因組滴度有著顯著提升

平行測試兩個品牌轉染試劑:Polyplus FectoVIR®轉染試劑(“Polymer F")以及Polyplus PEIpro®轉染試劑(“Polymer P"),在加入Mirus RevIT™ AAV Enhancer,針對不同血清型AAV2、AAV8、AAV9,AAV基因組滴度分別有著1.7-2.0x、1.7-2.2x、2.2-2.3x提升(圖2)。實驗結果表明,在搭配其他品牌病毒轉染試劑時,Mirus RevIT™ AAV Enhancer也可顯著提高AAV病毒基因組滴度(GC/mL)。

RevIT AAV transfection enhancer improves titer across serotypes

圖2. “Polymer F"以及“Polymer P"病毒轉染試劑搭配Mirus RevIT™ AAV Enhancer,針對不同血清型AAV,其病毒基因組滴度都有著顯著提升。

RevIT™ AAV Enhancer具有廣泛的適配性,可適用于不同培養基體系

Mirus TransIT-VirusGEN®轉染試劑搭配RevIT™ AAV Enhancer,在不同品牌的病毒生產培養基中,具有很好的兼容性。測試使用293-VP 2.0細胞,搭配培養基類型包括VPM (Thermo Fisher) 及 BalanCD HEK 293 (Irvine Scientific)。實驗結果表明,針對不同血清型AAV2、AAV5、AAV8、AAV9,RevIT™ AAV Enhancer在不同培養基實驗條件下,AAV病毒基因組滴度提升方面并無顯著差異(圖3)。

A graph of different sizes and colors Description automatically generated

圖3. 更換不同品牌病毒生產培養基,AAV病毒基因組滴度的增加無顯著差異。


Rev
IT™ AAV Enhancer實驗流程更靈活,在轉染的不同時間窗口加入有著近似表現

為了進一步確認加入RevIT™ AAV Enhancer來提高AAV產量是否需要嚴格把控加入時間,平行測試了不同加入的時間點,包括轉染前30min或60min、轉染時及轉染后。實驗結果顯示,相比于對照組,在不同時間點加入RevIT™ AAV Enhancer, AAV8病毒基因組滴度均有穩步的提升(2倍),并且病毒實心率也穩定保持在相同水平(圖4)。該實驗結果表明,RevIT™ AAV Enhancer加入時間點的靈活性,一定程度上簡化了生產工作流。






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圖4.  RevIT™ AAV Enhancer在轉染的不同時間窗口加入有著近似表現

 RevIT™ AAV Enhancer提高AAV產量的利器

實驗tips:如何進行病毒轉染試劑評估?什么是病毒載量?如何檢測?

  更多詳細信息,請查看Technical Resources中Virus Titer Reference Card ,更加詳細地介紹了檢測和計算病毒滴度的詳細方法。

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相關產品信息及鏈接

產品名稱

規格

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RevIT™ AAV Enhancer

1.5 ml

MIR 8000

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10 x 1.5 ml

MIR 8006

VirusGEN® AAV轉染試劑及RevIT™ AAV Enhancer

For 1L of Culture

MIR 8007

For 10L of Culture

MIR 8008

TransIT-VirusGEN®轉染試劑

0.3 ml

MIR 6703

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0.75 ml

MIR 6704

1.5 ml

MIR 6700

5 x 1.5 ml

MIR 6705

10 x 1.5 ml

MIR 6706

30 ml

MIR 6720

TransIT-VirusGEN® GMP級別轉染試劑

150 ml

MIR 6845-GMP

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VirusGEN® AAV轉染試劑(套裝)

1 kit for 1 L of cell culture

MIR 6750

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VirusGEN® GMP級別AAV轉染試劑(套裝)

1 Kit - for 50 L of cell culture

MIR 6815-GMP

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VirusGEN® LV轉染試劑(套裝)

1 kit for 1 L of cell culture

MIR 6760

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VirusGEN® GMP級別LV轉染試劑(套裝)

1 Kit - for 50 L of cell culture

MIR 6825-GMP

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請登錄Mirus線上工具Reagent Agent®,支持超過1000種細胞類型、多種核酸類型轉染試劑查詢。

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Mirus產品年鑒

   西美杰代理的美國Mirus公司成立于1995年,是世界上很早開發高效、低毒轉染試劑的公司,同時也是該類試劑的主要供應商之一。其產品線涵蓋化學轉染試劑、電轉染產品、病毒生產和轉導產品,適用于基因功能研究、蛋白生產、病毒載體生產和動物模型構建等領域。Mirus許多杰出成果獲得廣大用戶的好評。

 

   北京西美杰科技有限公司是Mirus中國區代理,始終秉承著專業、嚴謹的態度為客戶提供優質的產品與服務Mirus熱銷轉染產品常備現貨。西美杰是Applichem代理,KERRY代理,Pfanstiehl代理,Cygnus代理,c-LEcta DENARASE®代理,SeraCare (KPL)代理,Lifespan(LSBio)代理,Phytotech代理,Agrisera代理,Cali-Bio代理,Jena Bioscience代理,Immundiagnostik代理,Advanced BioMatrix代理,Mirus代理,Alzet代理Genetics代理,Cell Biolabs代理,MYOCEA代理,Gropep代理,MyBioSource代理,Hampton代理,LeeBio代理,Cal Bioreagents代理,Everest Biotech代理,Nordic-Mubio(SCICONS)代理,Exalpha代理,SCIGEN代理,MiTeGen代理,Prospec代理,歡迎大家咨詢訂購。




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