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上海科哲生化科技有限公司
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薄層色譜儀的操作和應(yīng)用
一、薄層色譜操作
?、胖瓢?以硅膠板為例)
選擇合適的玻璃板(經(jīng)常使用顯微鏡上的載玻片)，依次用水和乙醇洗凈，晾干。取適量薄層色譜用的硅膠，加適量蒸餾水調(diào)成糊。調(diào)制時慢慢攪拌，勿使產(chǎn)生氣泡。將糊倒在玻璃板上，搖動攤平，晾干。使用前放入烘箱內(nèi)，在105-115oC左右烘干40-50分鐘。冷卻后使用。
⑵點樣
將試樣用最少量展開劑溶解，用毛細(xì)管蘸取試樣溶液，在薄層板上點樣。在樣點上輕輕畫出一條平行于玻璃板底邊的細(xì)線。薄層色譜板載樣量有限，勿使點樣量過多。
⑶展開
吹干樣點，豎直放入盛有展開劑的有蓋展開瓶中。展開劑要接觸到吸附劑下沿，但切勿接觸到樣點。蓋上蓋子，展開。待展開劑上行到一定高度(由試驗確定適當(dāng)?shù)恼归_高度)，取出薄層板，再畫出展開劑的前沿線。
?、蕊@色，計算Rf值
揮發(fā)干展開劑，選擇合適的顯色方法顯色。量出展開劑和各組分的移動距離，計算各組分的相對移動值。
二、薄層色譜應(yīng)用
⑴可用于判斷兩個化合物是否相同(同一展開條件下是否有相同的移動值)；
?、瓶捎糜诖_定混合物中含有的組分?jǐn)?shù)；
⑶可用于為柱色譜選擇合適的展開劑，監(jiān)視柱色譜分離狀況和效果；
?、瓤捎糜跈z測反應(yīng)過程。