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猴α1-B-糖蛋白(α1BG)ELISA試劑盒
試劑盒性能
1. 檢測范圍:1.95 nmol/L –100 nmol/L。
2. 靈敏度:檢測濃度小于0.78 nmol/L。
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性:板內變異系數小于10% ,板間變異系數小于15% 。
猴α1-B-糖蛋白(α1BG)ELISA試劑盒
實驗原理
酶聯免疫吸附試驗(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一種基于抗原抗體反應的免疫學檢測方法。其基本原理是利用抗原抗體的特異性結合,通過酶對底物反應的顯色反應,對樣本中的待測物質進行定量或定性分析。ELISA方法具有靈敏度高、特異性強、操作簡便、適用范圍廣等特點,因此在生物醫學研究、臨床診斷和食品安全檢測等領域得到了廣泛應用。
實驗步驟
1. 準備試劑盒:將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置30分鐘以上,使試劑盒恢復至室溫。
2. 加樣:分別向各孔中加入標準品、待測樣本和空白孔,每孔加入50μl。
3. 孵育:用封板膠紙封住反應孔,輕輕振蕩混勻,37℃孵育1小時。
4. 洗滌:甩去孔內液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
5. 加酶標二抗:每孔加入50μl酶標二抗溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育30分鐘。
6. 洗滌:甩去孔內液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
7. 加底物:每孔加入50μl底物溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育15-20分鐘。
8. 終止反應:每孔加入50μl終止液,輕輕振蕩混勻。
9. 讀數:用酶標儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值。
注意事項
1. 試劑盒保存于2-8℃,切勿反復凍融或長時間保存于室溫。
2. 實驗前確保所有試劑均已恢復至室溫。
3. 加樣時注意避免產生氣泡。
4. 洗滌時要保證充分洗滌,避免殘留物影響實驗結果。
5. 底物溶液應避光保存,避免長時間暴露于空氣中。
6. 酶標儀應使用450nm波長進行讀數,其他波長可能導致誤差。
7. 本試劑盒僅用于科研實驗和診斷參考,不適用于臨床診斷和治療。
洗板方法
1.手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5次。
2.自動洗板機:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
結果判斷:
1. 每個標準品的OD值減去空白孔的OD值后作圖,如設置復孔,則應取其平均值計算。以標準品的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,繪出標準曲線。亦可以OD值為橫坐標,標準品的濃度為縱坐標,繪出標準曲線。
2. 推薦使用專業的曲線制作軟件,如curve expert 1.3或1.4,在軟件界面既可根據樣品OD值,由標準曲線查出相應的濃度,乘以稀釋倍數;亦可將樣品的OD值代入標準曲線的擬合方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
3. 若樣品OD值高于標準曲線上限,應適當稀釋后重測,計算濃度時應乘以稀釋倍數。
ELISA試劑盒適用行業
ELISA試劑盒廣泛應用于生命科學研究、臨床醫學和工業等領域。
1.在生命科學研究領域,ELISA試劑盒可以用于檢測細胞因子、激素、酶、抗體等分子的含量和活性,用于生理學、免疫學、分子生物學等研究領域。
2.在臨床醫學診斷中,ELISA試劑盒可以用于檢測血清中的腫瘤標志物、病毒抗體、心肌酶等指標,用于臨床診斷及疾病監測。
3.在食品安全檢測中,ELISA試劑盒可以用于檢測食品中的抗生素殘留、農藥殘留等有害物質,用于食品質量檢測和安全評估。
4.在環境監測中,ELISA試劑盒可以用于檢測環境中的化學物質、微生物等污染物,用于環境監測和污染治理。
5.在動物疾病防控中,ELISA試劑盒可以用于檢測動物血清中的病毒抗體、細菌抗原等指標,用于動物疫病防控和獸藥殘留檢測。
總之,ELISA試劑盒在許多行業中都有廣泛的應用。
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