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供貨周期 | 現貨 |
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猴神經調節蛋白2(NRG-2)ELISA試劑盒
試劑盒組成
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
20倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 23ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
操作步驟:
1. 加樣:設置空白孔、標準孔和待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl。注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。每次實驗都應制作標準曲線。如果樣品濃度過高,可以用樣品稀釋液進行稀釋,使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物su標記抗體工作液 100μl(取1μl生物su標記抗體加99μl生物su標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
3. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物su標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
5. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
6. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內進行檢測
猴神經調節蛋白2(NRG-2)ELISA試劑盒
結果分析
根據試劑盒提供的標準品濃度及對應的OD值,利用標準品繪制的標準曲線,計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數據處理,通過計算得到待測樣品的濃度。
注意事項
在進行ELISA檢測時,需要注意以下幾點:
1. 保證試劑盒的質量:選擇質量可靠、經過認證的試劑盒,避免使用過期或質量不穩定的試劑。
2. 標準化操作:按照試劑盒說明書進行標準化操作,避免操作過程中的人為誤差。
3. 避免交叉污染:在實驗過程中,要特別注意防止樣品和試劑之間的交叉污染,以免影響檢測結果的準確性。
4. 溫度控制:ELISA檢測需要在恒溫條件下進行,因此要確保實驗過程中溫度的穩定和準確性。
5. 空白吸光度值:在實驗過程中,要特別注意空白吸光度值的穩定性,避免其對檢測結果的影響。
6. 實驗數據的處理:對實驗數據進行正確的處理和分析,包括對異常值的處理、數據轉換等,以確保結果的準確性和可靠性。
7. 質量控制:在實驗過程中,應進行必要的質量控制,如定期進行室內質控和室間質評等,以確保實驗室檢測結果的準確性。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心 30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗原理
1. 抗體或抗原的吸附:將待測抗原或抗體吸附到固相載體上,常用的載體有微孔板、玻璃纖維、聚苯乙烯等。這些載體表面具有特殊的化學基團,能夠與待測抗原或抗體特異性結合。
2. 酶標記的抗體或抗原的結合:將酶標記的抗體或抗原與待測抗原或抗體結合,形成酶標記的抗原-抗體復合物。酶標記的抗體或抗原具有高度的特異性和親和力,能夠與待測抗原或抗體形成穩定的復合物。
3. 底物顯色反應:當酶標記的抗原-抗體復合物與底物溶液接觸時,酶能夠催化底物分解,產生顏色變化。通過測量顏色的變化程度,可以判斷待測抗原或抗體的濃度。
公司簡介
篤瑪生物成立的初衷就定位于以人為本,以品質取勝的理念,為我們國家生命科學研究做一些力所能及的工作。公司主要經營的產品有測試盒、標準品、有機試劑以及常用的進口試劑品牌的代理,質量保證。多年來我們一直堅守著這個承諾,在工作中自始至終貫穿著為科研服務-這個一貫的宗旨。我們由衷的感謝海內外科學家、感謝國內外廣大科研工作者、學者予以我們鼎力的支持和理解,我們將在未來的工作中,
百尺竿頭,發揮優勢,勇于開拓、自主創新、敢為人先、鍥而不舍,在生命科學的道路上,不斷進取,奮發努力,瞄準國際生命科學的前沿,不斷創新研發新產品。為科研工作提供更好、更人性化的服務。
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