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猴胱天蛋白酶4(CASP4)酶聯(lián)免疫試劑盒

參  考  價:1450 - 2500
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 型號

  • 品牌

    DUMABIO/篤瑪生物

  • 廠商性質(zhì)

    經(jīng)銷商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

96T 2500元 1000盒可售

48T 1450元 1000盒可售

更新時間:2024-09-09 11:51:02瀏覽次數(shù):191次

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供貨周期 現(xiàn)貨
猴胱天蛋白酶4(CASP4)酶聯(lián)免疫試劑盒
上海篤瑪生物科技有限公司長期為高校及醫(yī)院等研究機構提供各類品質(zhì)過硬,價格實惠,售后完善的生化試劑,公司擁有完善的庫存及供應體系以及高效穩(wěn)定的利純化技術,保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性,相關活動信息可聯(lián)系客服。

僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!


猴胱天蛋白酶4(CASP4)酶聯(lián)免疫試劑盒 


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產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T(可拆)

產(chǎn)品數(shù)量:咨詢

產(chǎn)品應用:ELISA實驗

產(chǎn)品貨期:現(xiàn)貨

有效期:6個月

保存條件:2-8℃


試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被相關指標的抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關指標呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。


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準備工作

1.孔板室溫平衡1小時

2.做好布板圖譜

3.樣本解凍

4.準備各型號的移液槍、槍頭、量筒

5.準備雙蒸水

6.根據(jù)樣本量配好樣本希釋液

7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液

8.若需要提前設置好振板器、洗板器

9.準備足夠量的擦手紙

10.根據(jù)說明書提示,溶解標準品

11.配制不同濃度的標準品

12.配制質(zhì)控品

13.根據(jù)預實驗結果稀釋樣本

14.準備好封板膜


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實驗步驟

1. 抗原包被:將抗原溶液加入到酶標板孔中,包被抗原,使其在孔底形成一層薄膜。

2. 清洗:清洗酶標板,去除未結合的抗原和其他雜質(zhì)。

3. 阻斷:加入阻斷液,封閉酶標板孔中的非特異性結合位點,以減少非特異性結合。

4. 清洗:清洗酶標板,去除未結合的阻斷液和其他雜質(zhì)。

5. 加樣:加入待測樣本,使其與抗原發(fā)生特異性結合。

6. 清洗:清洗酶標板,去除未結合的樣本和其他雜質(zhì)。

7. 加酶標抗體:加入酶標記的抗體,使其與特異性結合的樣本中的待測物質(zhì)發(fā)生反應。

8. 清洗:清洗酶標板,去除未結合的酶標抗體和其他雜質(zhì)。

9. 顯色反應:加入底物溶液,發(fā)生酶催化反應,產(chǎn)生有色產(chǎn)物。

10. 終止反應:加入終止液,停止酶催化反應。

11. 檢測:用酶標儀測定各孔的光密度值,記錄數(shù)據(jù)。


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注意事項

在進行ELISA檢測時,需要注意以下幾點:

1. 保證試劑盒的質(zhì)量:選擇質(zhì)量可靠、經(jīng)過認證的試劑盒,避免使用過期或質(zhì)量不穩(wěn)定的試劑。

2. 標準化操作:按照試劑盒說明書進行標準化操作,避免操作過程中的人為誤差。

3. 避免交叉污染:在實驗過程中,要特別注意防止樣品和試劑之間的交叉污染,以免影響檢測結果的準確性。

4. 溫度控制:ELISA檢測需要在恒溫條件下進行,因此要確保實驗過程中溫度的穩(wěn)定和準確性。

5. 空白吸光度值:在實驗過程中,要特別注意空白吸光度值的穩(wěn)定性,避免其對檢測結果的影響。

6. 實驗數(shù)據(jù)的處理:對實驗數(shù)據(jù)進行正確的處理和分析,包括對異常值的處理、數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換等,以確保結果的準確性和可靠性。

7. 質(zhì)量控制:在實驗過程中,應進行必要的質(zhì)量控制,如定期進行室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評等,以確保實驗室檢測結果的準確性。


猴胱天蛋白酶4(CASP4)酶聯(lián)免疫試劑盒 

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洗板方法

1.手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5次。

2.自動洗板機:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。


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結果判斷:

1. 每個標準品的OD值減去空白孔的OD值后作圖,如設置復孔,則應取其平均值計算。以標準品的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,繪出標準曲線。亦可以OD值為橫坐標,標準品的濃度為縱坐標,繪出標準曲線。

2. 推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件,如curve expert 1.3或1.4,在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值,由標準曲線查出相應的濃度,乘以稀釋倍數(shù);亦可將樣品的OD值代入標準曲線的擬合方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

3. 若樣品OD值高于標準曲線上限,應適當稀釋后重測,計算濃度時應乘以稀釋倍數(shù)。 


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做ELISA標準曲線時需要重點注意的細節(jié)問題:

1、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內(nèi),包括上限和下限;而對于呈S型的標準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。

2、檢測標準樣品時,應按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。

3、標準曲線的樣品數(shù)一般為7個點,但至少要保證有5個點。

4、做出的標準曲線相關系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎樱话銇碚f,相關系數(shù)R至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999。

5、樣品的濃度等指標是根據(jù)標準曲線計算出來的,所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結果無從談起。

6、好采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度,這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。


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