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猴三肽基肽酶I(TPP1)酶聯免疫試劑盒
僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
產品規格:96T/48T(可拆)
產品數量:咨詢
產品應用:ELISA實驗
產品貨期:現貨
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
實驗原理
1. 抗原抗體反應
ELISA試劑盒中的抗原或抗體被固定在固相載體上,當加入待測樣本時,樣本中的抗原或抗體與固相載體上的抗原或抗體發生反應,形成抗原抗體復合物。
2. 酶標記物的結合
將酶標記物與特異性抗體或抗原結合,形成酶標記抗體或抗原。酶標記物在反應中起到催化作用,加速反應進程,提高檢測靈敏度。
3. 酶促反應
在酶標記物與抗原抗體復合物結合后,加入底物溶液,底物在酶的催化下發生氧化還原反應,產生顏色變化。顏色深淺與待測樣本中的抗原或抗體濃度成正比。
4. 吸光度檢測
將反應體系中的吸光度進行測量,通過比較標準品溶液與待測樣本溶液的吸光度值,即可計算出待測樣本中的抗原或抗體濃度。
標本的稀釋原則
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內,檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。計算濃度時,稀釋了“N"倍,標本的濃度應再乘以“N"。
標準品的稀釋原則
2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品xi釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內配制。 如配制150 pg/ml標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
生物su標記抗體的稀釋原則
臨用前以生物su標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物su標記抗體加990μl生物su標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則
臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
猴三肽基肽酶I(TPP1)酶聯免疫試劑盒
試劑盒組成
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品:36U/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
實驗步驟
1. 準備試劑盒:將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置30分鐘以上,使試劑盒恢復至室溫。
2. 加樣:分別向各孔中加入標準品、待測樣本和空白孔,每孔加入50μl。
3. 孵育:用封板膠紙封住反應孔,輕輕振蕩混勻,37℃孵育1小時。
4. 洗滌:甩去孔內液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
5. 加酶標二抗:每孔加入50μl酶標二抗溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育30分鐘。
6. 洗滌:甩去孔內液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
7. 加底物:每孔加入50μl底物溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育15-20分鐘。
8. 終止反應:每孔加入50μl終止液,輕輕振蕩混勻。
9. 讀數:用酶標儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值。
結果判斷
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
注意事項
1. 試劑盒保存于2-8℃,切勿反復凍融或長時間保存于室溫。
2. 實驗前確保所有試劑均已恢復至室溫。
3. 加樣時注意避免產生氣泡。
4. 洗滌時要保證充分洗滌,避免殘留物影響實驗結果。
5. 底物溶液應避光保存,避免長時間暴露于空氣中。
6. 酶標儀應使用450nm波長進行讀數,其他波長可能導致誤差。
7. 本試劑盒僅用于科研實驗和診斷參考,不適用于臨床診斷和治療。
公司簡介
上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學試劑及試劑盒的高科技生物企業。總部位于上海,并在全國設有經銷或代理機構。產品因可靠而穩定的質量和較為完善的售后服務確立了“篤瑪生物"良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產品為保障、以誠信為基礎、以創新為宗旨"的發展理念,擁有專業的研發和質量檢測團隊以及*的倉儲和物流系統。“篤瑪生物"已經得到全國科研工作者的認可。
公司擁有一批專業的研發人員,我們專注于生物產品的不斷完善和創新。產品覆蓋面廣,品質可靠。先后開發了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、生物醫學等領域的多種試劑及試劑盒。同時,提供各種常規生化試劑,庫存常備產品多達10000多種,可隨時為廣大科研工作者提供各類專業試劑。在質量方面,謹記公司信念:質量高于一切。所有研發的產品都設有嚴謹的生產流程,科學的質量檢測方法和成熟的質量檢測程序,我們恪守對每一位用戶的承諾:用專業的態度做專業的品牌。同時,公司組建了一支專業的技術服務隊伍,能夠為科研工作者提供專業的技術服務。每一位購買篤瑪生物產品的用戶都能夠得到專業的咨詢和完善的售后服務。
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