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猴葡萄糖轉運蛋白3(GLUT3)酶聯免疫試劑盒
實驗原理
1. 抗體或抗原的吸附:將待測抗原或抗體吸附到固相載體上,常用的載體有微孔板、玻璃纖維、聚苯乙烯等。這些載體表面具有特殊的化學基團,能夠與待測抗原或抗體特異性結合。
2. 酶標記的抗體或抗原的結合:將酶標記的抗體或抗原與待測抗原或抗體結合,形成酶標記的抗原-抗體復合物。酶標記的抗體或抗原具有高度的特異性和親和力,能夠與待測抗原或抗體形成穩定的復合物。
3. 底物顯色反應:當酶標記的抗原-抗體復合物與底物溶液接觸時,酶能夠催化底物分解,產生顏色變化。通過測量顏色的變化程度,可以判斷待測抗原或抗體的濃度。
試劑盒組成
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
準備工作
1.孔板室溫平衡1小時
2.做好布板圖譜
3.樣本解凍
4.準備各型號的移液槍、槍頭、量筒
5.準備雙蒸水
6.根據樣本量配好樣本xi釋液
7.根據樣本量及洗板次數配好洗液
8.若需要提前設置好振板器、洗板器
9.準備足夠量的擦手紙
10.根據說明書提示,溶解標準品
11.配制不同濃度的標準品
12.配制質控品
13.根據預實驗結果稀釋樣本
14.準備好封板膜
實驗步驟
1. 準備試劑盒:將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置30分鐘以上,使試劑盒恢復至室溫。
2. 加樣:分別向各孔中加入標準品、待測樣本和空白孔,每孔加入50μl。
3. 孵育:用封板膠紙封住反應孔,輕輕振蕩混勻,37℃孵育1小時。
4. 洗滌:甩去孔內液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
5. 加酶標二抗:每孔加入50μl酶標二抗溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育30分鐘。
6. 洗滌:甩去孔內液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
7. 加底物:每孔加入50μl底物溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育15-20分鐘。
8. 終止反應:每孔加入50μl終止液,輕輕振蕩混勻。
9. 讀數:用酶標儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值。
猴葡萄糖轉運蛋白3(GLUT3)酶聯免疫試劑盒
結果分析
根據試劑盒提供的標準品濃度及對應的OD值,利用標準品繪制的標準曲線,計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數據處理,通過計算得到待測樣品的濃度。
產品包裝:盒裝
性狀:瓶裝液體
規格:96T/48T
保存條件:2-8℃
保存期限:6個月
運輸條件:2-8℃低溫運輸,用干冰或者生物冰袋低溫運輸。
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