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如何獲得純凈且活性的膜蛋白
Rho1D4 tag / 1D4 tag
Rho1D4，也叫“1D4"，是一種親和標記物，包含了九種氨基酸(T-E-T-S-Q-V-A-P-A)。該標記物優先與目標蛋白的C端結合。瓊脂糖和磁珠與相對應的Rho1D4-抗體能夠純化標記了Rho1D4標簽的蛋白。Rho1D4蛋白純化實驗不僅擁有基于其它抗體為基礎的蛋白純化特別高的專一特異性，并且蛋白的產量也很高。關于Rho1D4的更多信息，我們撰寫了一本指南為您提供所有必須信息。
產品技術參數
用途 | 特異性結合和純化Rho1D4標記的蛋白 |
特異性 | 具有與Rho1D4標記的蛋白親和力 |
穩定性 | 高耐受去污劑 |
微球配基 | Rho1D4抗體 |
蛋白產量 | 3-4 mg/ ml瓊脂糖或磁珠 |
標記序列 | TETSQVAPA |
為什么選擇庫柏生物（Cube Biotech）的Rho1D4 Tag蛋白純化產品?
選擇Cube Biotech公司的理由有很多。以下為其中幾點:
（1）標記的大小：902.9 Da， 9個氨基酸(TETSQVAPA)
（2）每毫升樹脂蛋白產量：3-4 mg/ml
（3）相互作用的特異性：KD：20 nM
（4）洗脫條件：Rho1D4肽、低pH值或標記裂解
Cube Biotech的Rho1D4親和蛋白純化的產品概覽：
Rho1D4 瓊脂糖 (40 µm) | Rho1D4 瓊脂糖 (40 µm) | Rho1D4 磁珠(30 µm) |
Rho1D4瓊脂糖(90µm大粒徑) | Rho1D4瓊脂糖 (40 µm) 通用型預裝柱 | Rho1D4磁珠 (大粒徑) |
Rho1D4 Starter試劑盒——面向所有想要嘗試Rho1D4標簽的用戶。 | ||
Starter試劑盒 1 (1 mL 瓊脂糖 + 5 mg 肽) | Starter試劑盒3 (1 x 1 mL 預裝柱 + 5 mg 肽) | Starter試劑盒 2 (1 mL 磁珠+ 5 mg 肽) |
Starter試劑盒 4 (1 x 1ml 小型預裝柱 + 5mg 肽) |
Rho1D4蛋白純化支持產品:
Rho1D4 肽 (用于蛋白競爭洗脫) | Rho1D4 帶 GFP標簽 (用于對照) | Rho1D4 抗體 [鼠源] (用于western blot) |
Cube Biotech的Rho1D4產品在以下論文刊物中出現：
高特異性和高產量的蛋白純化
PureCube系列瓊脂糖依據嚴格的質量標準進行生產，每一批次均經過質量檢驗，以確保加載的基質具有高蛋白載量。由于抗原-抗體表位相互作用的特異性，針對目標蛋白優化的純化操作流程可以產生高產量的洗脫組份。圖1 展現了趨化因子受體4（CXCR4）的純化過程。標記的目標蛋白在大腸桿菌中表達，用Fos-Choline®-14進行溶解，并在裝有PureCube Rho1D4瓊脂糖的預裝柱上進行純化。以Rho1D4肽作為洗脫劑，4個洗脫組分的蛋白質總復原濃度為0.8、1.0、0.85和0.6mg/mL。通過western blot顯示CXCR4約在 65 kDa 和 35 kDa之間。這些條帶代表 39.7 kDa 膜蛋白的二聚體和單體。單體和二聚體的分離，就像去除洗脫肽的方式一樣，可以通過排阻層析的方式完成。
純凈且活性的膜蛋白
膜蛋白純化結果無法用更常用的瓊脂糖（如 Ni-NTA）進行保存。因此，Rho1D4是您獲得純凈且活性的膜蛋白可以選擇的方式。
圖1.使用 Rho1D4 標記膜蛋白成功純化的考馬斯亮藍色染色。A：~65kDa的蛋白質單體。B：~135kDA的四聚體。C： 異二聚體，均可見亞基，和一條較小的不可識別條帶。懷疑為降解產物。
References:
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3. Ahmed, Chulbul M., et al. "SRD005825 Acts as a Pharmacologic Chaperone of Opsin and Promotes Survival of Photoreceptors in an Animal Model of Autosomal Dominant Retinitis Pigmentosa." Translational Vision Science & Technology 8.6 (2019): 30-30.
4. Liu, Da-Wei et al. (2018). The Cone Opsin Repertoire of Osteoglossomorph Fishes: Gene Loss in Mormyrid Electric Fish and a Long Wavelength-Sensitive Cone Opsin That Survived 3R. Molecular Biology and Evolution. 10.1093/molbev/msy241.
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