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液相色譜法檢測人血漿中頭孢丙烯順式和反式異構體
頭孢丙烯為第二代頭孢菌素類抗生素，具有廣譜抗菌作用。臨床用于治療敏感菌所致的輕、中度感染。頭孢丙 烯中順式異構體的含量在90%以上，而反式異構體只占10%以下。順反式異構體在化學穩定性和抗革蘭陽性鏈球菌和葡萄球菌活性方面是相同的，但在抗革蘭陰性大腸埃希桿菌、肺炎克雷伯菌等方面，順式的抗菌活性是反式的6～8倍。
可采用液相色譜同時測定人血漿中順式（Z）和反式（E）異構體濃度。
檢測所需儀器
液相色譜儀，配有 工作站； 旋渦混合器； 高速臺式離心機。
色譜條件
色譜柱：（200×4.6 mm，5μm）；流動相：0.05 mol/L磷酸二氫鈉溶液（磷酸調pH值2.50）-乙腈（88：12）；檢測波長：280nm；柱溫：30 ℃；流速：1.2 ml/min；進樣量：50μl。
測定方法
1 精密量取血漿樣品500μl，加入內標（100.2μg/ml頭孢拉定）50μl，20%三氯醋酸100μl，漩渦混合1分鐘，離心6分鐘，取上層液，依次加入乙腈0.5ml和二氯甲烷2ml，振蕩6分鐘，離心6分鐘，取上層液離心6分鐘，取50μl上清液進樣分析。
2 精密量取空白血漿500μl，分別加入順式（Z）和反式（E）異構體標準系列溶液各50μl，配制成血漿中順式（Z）異構體濃度為0.1003，0.3008，1.0025，2.0050，4.0100，8.0200，16.0400μg/ml和反式（E）異構體濃度為20.0，40.1，100.2，200.4，400.8，1002.0，1603.2ng/ml的血漿樣品，按“血漿樣品處理”項下自“加入內標溶液”起同法試驗，以待測物濃度為橫坐標X，待測物與內標物的峰面積比值（AS/Ai）為縱坐標Y，用加權zui小二乘法[2]（權重系數：1/X2）進行線性回歸運算，求得的線性回歸方程即為標準曲線方程。