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液相色譜測定蕓苔素內酯含量
蕓苔素內酯為甾醇類植物激素,在很低的濃度下,能明顯地增加植物的營養體生長和促進受精作用。由于其結構中不含紫外吸收基團,必須先衍生化再進行液相色譜法(HPLC)、紫外檢測器測定。衍生化方法據報道有Camohde的1-氰基異吲哚-2-間-苯硼酸、二茂鐵硼酸、9-菲硼酸、Takatsuto萘硼酸等。本文采用1-二jia胺基萘將試樣制備成1-二jia胺基萘衍生物后,以甲醇加水為流動相,使用以Spheri C18為填充物的不銹鋼柱和紫外檢測器(275nm),不但對原藥和各種制劑中蕓苔素內酯而且能對部分中間體進行液相色譜分離和測定,精密度和準確度都很好。
儀器準備
儀器簡介
LC-600A智能全控液相色譜系統由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構成等度分析系統。使用WS600工作站可以同時控制數臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
應用領域
化合物檢測、法醫毒物分析、蛋白質組學食品檢測、藥物分析、環境分析、聚合物分析
色譜條件:
色譜柱 | 250mm×4.6mm(id)不銹鋼柱,內裝Spherisorb C18 填充物5μm |
流動相 | (甲醇:水)=900:100(流動相置超聲波清洗器中脫氣10min,再用5μm不銹鋼微孔濾器過濾) |
進樣體積 | 10μL |
流量 | 1.5mL/min-1 |
柱溫 | 40℃ |
檢測波長 | 275nm |
譜圖分析: