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液相色譜法檢測人尿中維生素B?的含量
液相色譜法檢測人尿中維生素B?的含量
維生素B?(VB?)又叫做核黃素,是黃粟腺嘌呤二核苷酸和黃素單核苷酸2種輔酶的組成成分,廣泛存在于各種組織細胞中,參與各種氧化還原反應,包括三羧酸循環中的直接氧化磷酸化以及脂肪酸的合成與氧化等代謝。維生素B?缺乏不僅影響糖代謝,而且影響到脂肪代謝,改變血漿與組織中磷脂的濃度,并且能阻斷食入的維生素B?與葉酸轉變為他們的輔酶衍生物,維生素B?缺乏時可出現外生殖器或皮膚粘膜病變。
文獻中報道了很多關于檢測食物、藥物中的維生素B?的方法,其中有波層色譜法、液相色譜法、也質聯用法等。因為維生素的代謝情況影響其他藥物的吸收也預示著身體所處的健康情況,近年來很多國外工作者都在研究脂溶性維生素在人體內代謝的情況。包括研究脂溶性維生素在人體血樣、尿樣中的代謝物和各組織中脂溶性維生素的含量。但是國內外對水溶性的維生素在人體內的代謝情況研究甚少,所以本文選取水溶性的維生素B?,通過研究人體服用過量的維生素B?后其排放到尿樣中的含量來了解維生素B?在人體內的代謝情況。
儀器準備
儀器簡介
LC-600A智能全控液相色譜系統由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構成等度分析系統。使用WS600工作站可以同時控制數臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
應用領域
化合物檢測、法醫毒物分析、蛋白質組學食品檢測、藥物分析、環境分析、聚合物分析
樣品處理:
健康女性志愿者(25歲)禁食12h后收集空白尿樣,服VB?片劑5片(10mg/片),服用藥片后收集1、2、4、6、8 h后的尿樣,尿樣經7cm定性濾紙和0.45μm的微孔濾膜過濾后置
-20℃的冰箱中保存。
分離條件:
流動相 | 0.01mol/l醋酸銨緩沖液和乙腈 |
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檢測波長 | 267nm |
流動相流速 | 0.8ml/min |
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測定結果: