前言:
白酒是世界六大蒸餾酒之一,是以糧谷為主要原料,以大曲、小曲、麩曲、酵母等作為發(fā)酵劑,經(jīng)蒸煮、發(fā)酵、蒸餾、勾調(diào)等多道工藝釀造而成。白酒的釀造需經(jīng)歷多種微生物混合發(fā)酵,微生物代謝會(huì)產(chǎn)生各種功能成分,如γ-氨基丁酸和核苷類物質(zhì)等。其中,核苷類物質(zhì)具有增強(qiáng)免疫、抗氧化、抗癌等生物活性,具有一定的保健作用。腺苷能顯著提高細(xì)胞活力,在機(jī)體的中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和凝血系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用。尿苷具有促進(jìn)睡眠和抗癲癇的作用,改善記憶功能。
本篇文章采用了皖儀科技高效液相色譜儀LC3400系列配置紫外檢測(cè)器對(duì)白酒中核苷類物質(zhì)含量進(jìn)行檢測(cè)。系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,尿苷和腺苷色譜峰的理論塔板數(shù)均在7000以上。核苷類混合標(biāo)準(zhǔn)溶液重復(fù)進(jìn)樣6次,尿苷保留時(shí)間RSD值為0.0537%,峰面積RSD值為0.3859%。腺苷保留時(shí)間RSD值為0.2240%,峰面積RSD值為0.3866%。重復(fù)性較好。尿苷和腺苷的線性良好,線性相關(guān)系數(shù)均>0.999,尿苷的檢出限為0.67 μg/L,定量限為2.23 μg/L;腺苷的檢出限為15.63 μg/L,定量限為52.09 μg/L。以某品牌白酒作為測(cè)試樣品,該品牌白酒未檢測(cè)出尿苷和腺苷,檢測(cè)結(jié)果正常。說明了該方法配備皖儀科技LC3400系列儀器滿足對(duì)白酒中核苷類物質(zhì)含量的檢測(cè)需求。
關(guān)鍵詞:尿苷;腺苷;高效液相色譜法;紫外檢測(cè)器;白酒。
1. 實(shí)驗(yàn)方法
1.1儀器配置
1.2實(shí)驗(yàn)材料及輔助設(shè)備
甲醇:色譜純;
尿苷標(biāo)準(zhǔn)品;
腺苷標(biāo)準(zhǔn)品;
分析天平;
超聲波清洗機(jī);
渦旋混合器;
0.22μm水系濾膜。
1.3測(cè)試條件
1.4溶液配制
1.4.1核苷類物質(zhì)標(biāo)曲實(shí)驗(yàn)工作液
精密稱取尿苷標(biāo)準(zhǔn)品1.00 mg和腺苷標(biāo)準(zhǔn)品10.00 mg置于同一 10 mL容量瓶中,用10%甲醇水溶解并定容,可得尿苷濃度為100μg/mL和腺苷濃度為 1000μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)母液。再用10%甲醇溶液倍比稀釋成混合標(biāo)準(zhǔn)系列,可得,核苷類混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中尿苷濃度分別為100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2 μg/mL、1 μg/mL、
0.5 μg/mL;腺苷濃度分別為1000 μg/mL、500 μg/mL、250 μg/mL、100 μg/mL、50 μg/mL、20 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL。
2.結(jié)果與討論
2.1系統(tǒng)適用性
說明:由上述譜圖可見,尿苷色譜峰的保留時(shí)間為4.953 min,腺苷色譜峰的保留時(shí)間為17.245 min,理論塔板數(shù)均在7000以上。
2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線
說明:本次測(cè)試的核苷類混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中尿苷濃度分別為100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2 μg/mL、1 μg/mL、0.5 μg/mL;腺苷濃度分別為1000 μg/mL、500 μg/mL、250 μg/mL、100 μg/mL、50 μg/mL、20 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL。尿苷和腺苷的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍較好,線性相關(guān)系數(shù)均>0.999,滿足實(shí)驗(yàn)分析需求。
2.3 重復(fù)性
說明:核苷類混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(尿苷25 μg/mL,腺苷250μg/mL)重復(fù)進(jìn)樣6次,尿苷保留時(shí)間RSD值為0.0537%,峰面積RSD值為0.3859%。腺苷保留時(shí)間RSD值為0.2240%,峰面積RSD值為0.3866%。重復(fù)性較好。
2.4 檢出限
說明:以信噪比(S/N)為3確定檢出限(LOD),尿苷檢出限為0.67 μg/L,腺苷檢出限為15.63 μg/L。以信噪比(S/N)為10確定定量限(LOQ),尿苷定量限為2.23 μg/L,腺苷定量限為52.09 μg/L。
2.5 樣品測(cè)試
選擇某品牌白酒作為基質(zhì),準(zhǔn)確量取10 mL酒樣經(jīng)0.22μm水系濾膜過濾,進(jìn)樣量10 μL,供高效液相色譜儀測(cè)定。
說明:該品牌白酒未檢測(cè)出尿苷和腺苷,檢測(cè)結(jié)果正常。
2.6 注意事項(xiàng)
(1)在制備相關(guān)溶液時(shí)需要注意佩戴好實(shí)驗(yàn)室防護(hù)用品。
(2)相關(guān)溶液配制好后置于2-8℃保存。
3.結(jié)論
本篇文章采用了皖儀科技高效液相色譜儀LC3400系列配置紫外檢測(cè)器對(duì)白酒中核苷類物質(zhì)含量進(jìn)行檢測(cè)。系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,尿苷和腺苷色譜峰的理論塔板數(shù)均在7000以上。核苷類混合標(biāo)準(zhǔn)溶液重復(fù)進(jìn)樣6次,尿苷保留時(shí)間RSD值為0.0537%,峰面積RSD值為0.3859%。腺苷保留時(shí)間RSD值為0.2240%,峰面積RSD值為0.3866%。重復(fù)性較好。尿苷和腺苷的線性良好,線性相關(guān)系數(shù)均>0.999,尿苷的檢出限為0.67 μg/L,定量限為2.23 μg/L;腺苷的檢出限為15.63 μg/L,定量限為52.09 μg/L。以某品牌白酒作為測(cè)試樣品,該品牌白酒未檢測(cè)出尿苷和腺苷,檢測(cè)結(jié)果正常。說明了該方法配備皖儀科技LC3400系列儀器滿足對(duì)白酒中核苷類物質(zhì)含量的檢測(cè)需求。
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