皖儀科技高效液相色譜法檢測紅景天苷
摘要
目的 :使用高效液相色譜法檢測某藥品中紅景天苷的含量。方法:采用C18,4.6x250mm,5μm色譜柱,波長275nm,流動相A為水,流動相B為甲醇;流速為1.0ml/min;柱溫為30℃;進樣體積為5 μl。建立標準曲線,通過外標法計算目標物含量。結果:使用皖儀科技LC3200系列高效液相色譜儀搭配紫外檢測器進行檢測,紅景天苷結果較好,峰型對稱,理論塔板數較高;標準曲線線性范圍較好,線性相關系數>0.999;重復性結果較好,紅景天苷保留時間RSD值為0.055%,峰面積RSD值為0.340%;對某藥品中的紅景天苷進行檢測,根據標準曲線方程進行計算,供試品1中紅景天苷含量為0.061933mg/L,供試品2中紅景天苷含量為0.065566mg/L。
前言
紅景天為景天科植物大花紅景天的干燥根及根莖。紅景天屬植物在全世界有近100種,主要分布于喜馬拉雅山區、亞洲西北部和北美洲。我國有80多種,多分布于西南、西北、華北和東北地區,主產區有吉林、河北、青海、新疆Chemicalbook、四川、云南、貴州、西藏等省區。
紅景天是開發新的抗疲勞、抗缺氧和抗衰老的重要藥用植物來源。紅景天提取物以紅景天RhodiolaroseaL.等干燥的根莖為原料提取的產品,商品提取物通常標化為含紅景天苷4%。紅景天苷是從景天科植物大株紅景天的干燥根及根莖或干燥全草中提取的一種化合物,有預防腫瘤,增強免疫功能,延緩衰老,抗疲勞,抗缺氧,防輻射,雙向調節中樞神經,修復保護機體等作用。
通常用作對慢性病者和體弱易感染病人的治療。臨床用于治療神經衰弱和神經官能癥,提高注意力、記憶力,高原紅細胞增多癥,高血壓病;作為興奮神經劑,用于提高智能力、改善植物神經-血管張力障礙有肌無力等;用于自由基增多的疾患,如腫瘤,輻射損傷,肺氣腫,老年白內障等;還作為強壯劑,用于陽痿等;紅景天苷制劑還用于運動醫學及航天醫學,用于在各種特殊環境條件下工作人員的健康防護。
紅景天有適應原樣作用和雙向調節作用。經微波輻射的小鼠腦內單胺遞質、脾臟及胸腺內環磷酸腺苷、淋巴細胞轉化率、血清溶血素等出現抑制性變化,紅景天可使之恢復正常。注射紅景天苷后,能增強家兔的甲狀腺功能及腎上腺功能,并能興奮小鼠卵內分泌功能。提高注意力和記憶力。提高血漿中β-吲哚酚的水平,阻止壓力激素的變化。
關鍵詞:液相色譜;紫外檢測器;中藥;紅景天苷。
1 實驗方法
1.1 儀器配置
皖儀科技LC3200系列高效液相色譜儀
表1 高效液相色譜系統配置清單
1.2 測試條件
色譜柱:C18,5μm,4.6x250mm
柱溫:30℃;
檢測波長:275nm;
流速:1.0 ml/min;
流動相:A:水;B:甲醇
進樣量:5 μL;
梯度條件:
1.3 儀器及試劑、耗材
試劑:
超純水
甲醇(色譜純)
標準物質:紅景天苷(99.7%)
輔助裝置:
分析天平;
溶劑抽濾裝置;
超聲波清洗機;
實驗材料:
濾膜:水相濾膜0.45μm
1.4 溶液配制
1.4.1 標準系列溶液:稱取適量紅景天苷標準品置于容量瓶中,甲醇溶解,制成濃度為0.0084125mg/mL、0.016825mg/mL、0.03365mg/mL、0.0673mg/mL、0.1346mg/mL、0.2692mg/mL、0.673mg/mL。
1.4.2 樣品配制:稱取供試品1 1.0022g置于容量瓶中,加甲醇溶解定容至25mL。
稱取供試品2 1.0794g置于容量瓶中,加甲醇溶解定容至25mL。
2 結果與討論
2.1 系統適用性
圖1 紅景天苷標準品色譜圖
表2 紅景天苷標準品色譜參數表
分析:本次分析紅景天苷結果較好,峰型對稱,理論塔板數較高。
2.2 標準曲線
圖2 紅景天苷類系列標準溶液疊加色譜圖
圖3 紅景天苷標準溶液曲線方程及相關系數
分析:紅景天苷標準曲線線性范圍較好,線性相關系數>0.999。
2.3 重復性
圖4 紅景天苷標準品重復性譜圖(n=6)
表3 紅景天苷重復性色譜參數表(n=6)
分析:濃度為0.2692mg/L的紅景天苷連續進樣6次,重復性較好,保留時間RSD值為0.055%,峰面積RSD值為0.340%。
2.4 供試品1
圖5 供試品1色譜圖
表4 供試品1色譜參數
分析:根據標準曲線方程進行計算,供試品1中紅景天苷含量為0.061933mg/L。
2.5 供試品2
圖6 供試品2色譜圖
表4 供試品2色譜參數
分析:根據標準曲線方程進行計算,供試品2中紅景天苷含量為0.065566mg/L。
3 結論
使用皖儀科技LC3200系列高效液相色譜儀搭配紫外檢測器進行檢測,分析紅景天苷結果較好,峰型對稱,理論塔板數較高;標準曲線線性范圍較好,線性相關系數>0.999;重復性較好,濃度為0.2692mg/L的紅景天苷連續進樣6次,保留時間RSD值為0.055%,峰面積RSD值為0.340%;對某藥品中的紅景天苷進行檢測,根據標準曲線方程進行計算,供試品1中紅景天苷含量為0.061933mg/L。,供試品2中紅景天苷含量為0.065566mg/L。
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