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皖儀科技液相色譜對阿維菌素B1a的檢測

前言

2015年，日本科學家大村智、愛爾蘭科學家威廉·坎貝爾因研發抗寄生蟲特效藥物阿維菌素和伊維菌素做出的巨大貢獻，獲得了當年度的諾貝爾生理學或醫學獎，這充分說明了阿維菌素在人類生產生活中的重要作用。

阿維菌素憑借其高效、光譜、高選擇性的優點，不僅應用于防治果樹、蔬菜、糧食等作物的葉螨、癭螨、茶黃螨和各種抗性蚜蟲，也廣泛應用于殺滅魚、蝦等養殖水體和魚體體表寄生的錨頭鳋、中華鳋等寄生蟲及松藻蟲、水蜈蚣等水生昆蟲。但阿維菌素易殘留于水果和蔬菜等生物樣本中，當人長期食用含有阿維菌素農藥殘留的食物后，當阿維菌素殘留濃度達到一定量后，就會對人體的神經系統產生毒性作用，表現為四肢無力、肌肉震顫、抽搐和胃腸道反應，如惡心、嘔吐、腹瀉等。嚴重者還會出現對心臟的損害，如心律失常、心力衰竭等。所以，對阿維菌素殘留量的檢測很有必要。天然阿維菌素中含有8個組分，主要有4種即A1a、A2a、B1a和B2a，對應的4個比例較小的同系物是A1b、A2b、B1b和B2b。市售阿維菌素農藥是以阿維菌素B1a為主要殺蟲成分，以阿維菌素B1a的含量來標定。

本篇文章參考了《食品安全國家標準》GB23200.19-2016水果和蔬菜中阿維菌素殘留量的測定 高效液相色譜法條件，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置紫外檢測器進行檢測。

實驗結果表明，阿維菌素的線性良好，R值在0.999以上，阿維菌素標準品色譜峰正常，理論塔板數在4500以上。阿維菌素標準品重復進樣6次，定性RSD值為0.100%，定量RSD值為0.305%，重復性較好。最低檢出限為3.4μg/L。說明了該方法配備皖儀科技LC3200系列儀器滿足阿維菌素的檢測需求。

1    實驗方法

1.1  儀器配置

表1 高效液相色譜系統配置清單

1.2 測試條件

液相色譜條件

流動相：甲醇：水=89:11；

色譜柱：諾譜 Nova Atom SC18色譜柱,4.6×150mm；

柱溫：40℃；

流速：1.0 mL/min；

進樣量：20μL；

檢測波長：245nm。

1.3 試劑及實驗材料

甲醇：色譜純；標準物質：阿維菌素標準品：(1000μg/mL in Methanol)；超聲波清洗機。

1.4 溶液配制

1.4.1 阿維菌素標準工作液   

根據需要移取適量的阿維菌素標準品溶液（1000μg/mL），用甲醇稀釋成適當濃度的標準工作液。標準工作液需每周配制一次。

1.4.2 標準系列工作溶液

用甲醇對阿維菌素標準品溶液（1000 μg/mL）進行稀釋，配制質量濃度為0.025μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.50μg/mL、1.00μg/mL標準系列溶液，使用前取20μl注入色譜儀。

2    結果與討論

2.1 系統適用性

圖1 單進甲醇溶劑色譜圖

圖2 阿維菌素標準品色譜圖

表2 阿維菌素標準品色譜參數

說明：由上述譜圖可見，阿維菌素標準品色譜峰正常，保留時間為5.360 min，理論塔板數為4500以上。

2.2 標準曲線

圖3 阿維菌素標準曲線及相關系數

說明：本次測試的阿維菌素標準工作曲線濃度為0.025μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.50μg/mL、1.00μg/mL。阿維霉素標準曲線線性范圍較好，線性相關系數＞0.999，滿足實驗分析需求。

2.3 重復性

圖4 阿維霉素標準品重復性實驗色譜圖

表3 阿維霉素標準品色譜參數

說明：阿維菌素標準品重復進樣6次，保留時間RSD值為0.100%，峰面積RSD值為0.305%，重復性較好。

2.4 檢出限

圖5 阿維菌素標準品色譜圖

表4 阿維菌素標準品色譜參數及檢出限

說明：結果表明使用配備皖儀科技LC3200系列儀器檢測阿維菌素標準品的檢測限為3.4μg/L。

3 結論

本次采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置紫外檢測器，依據《食品安全國家標準》GB23200.19-2016水果和蔬菜中阿維菌素殘留量的測定 高效液相色譜法。實驗結果顯示，阿維菌素的線性良好，R值在0.999以上，阿維菌素標準品色譜峰正常，理論塔板數在4500以上。阿維菌素標準品重復進樣6次，定性RSD值為0.100%，定量RSD值為0.305%，重復性較好。最低檢出限為3.4μg/L。說明了該方法配備皖儀科技LC3200系列儀器滿足阿維菌素的檢測需求。