脈動真空滅菌是一種高溫蒸汽滅菌方法，蒸汽滅菌是一種古老的滅菌方法，在很早就開始使用。隨著滅菌技術的進步，高溫蒸汽滅菌演變成滅菌效果更好的脈動真空滅菌器。脈動真空的滅菌是以飽和蒸汽作為滅菌介質，使用機械抽真空的方式，將滅菌室內的空氣抽成真空，再注入蒸汽，再未達到設定的壓力和時間時，再次抽真空和注入蒸汽。待到設置的溫度和壓力時，生物受熱力作用加速運動，生物蛋白質肽段斷裂，破壞生物的酶和結構蛋白，從而殺死細菌。
許多因素會影響消毒劑的作用，而且各種消毒劑對這些因素的敏感性差異很大。
1.微生物的種類
不同類型的病原微生物對消毒劑抵抗力不同，因此，進行消毒時必須區別對待。
(1)細菌繁殖體 易被消毒劑消滅，一般革藍氏陽性細菌對消毒劑較敏感，革藍氏陰性桿菌則常有較強的抵抗力。繁殖體對熱敏感，消毒方法以熱力消毒為主。
(2)細菌芽胞 芽胞對消毒因子耐力至強，殺滅細菌芽胞可靠的方法是熱力滅菌，電離輻射和環氧乙烷熏蒸法。在化學消毒劑中，戊二醛、過氧乙酸能殺滅芽胞，但可靠性不如熱力滅菌法。
(3)病毒 對消毒因子的耐力因種類不同而有很大差異，親水病毒的耐力較親脂病毒強。
(4)真菌 對干燥、日光、紫外線以及多數化學藥物耐力較強，但不耐熱(60℃1小時殺滅)。
2.微生物的數量
污染的微生物數量越多需要消毒的時間就越長，劑量越大。
3.有機物的存在
①有機物在微生物的表面形成保護層妨礙消毒劑與微生物的接觸或延遲消毒劑的作用，以致于微生物逐漸產生對藥物的適應性。
②有機物和消毒劑作用，形成溶解度比原來更低或殺菌作用比原來更弱的化合物。
③一部分消毒劑與有機物發生了作用，則對微生物的作用濃度降低。
④有機物可中和一部分消毒劑。消毒劑中重金屬類、表面活化劑等受有機物影響較大，對戊二醛影響較小。
4.溫度
隨著溫度的升高，殺菌作用增強，但溫度的變化對各種消毒劑影響不同。如甲醛、戊二醛、環氧乙烷的濕度升高1倍時，殺菌效果可增加10倍。而酚類和酒精受溫度影響小。
5.PH值
從兩方面影響殺菌作用。①對消毒劑的作用：改變其溶解度和分子結構。②pH過高或過低對微生物的生長均有影響。在酸性條件下，細菌表面負電荷減少，陰離子型消毒劑殺菌效果好。在堿性條件下，細菌表面負電荷增多，有利于陽離子型消毒劑發揮作用。
6.處理劑量與監測
保證消毒、滅菌處理的劑量，加強效果監測，防止再污染。
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