MG1655 化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài) 菌株是 E. coli K-12 菌株和 E. coli B 菌株的雜合產(chǎn)物（同時也是 Stbl3 的原始菌株）。該菌株
攜帶 recA13 突變，可有效抑制長片段末端重復(fù)區(qū)的重組，降低錯誤重組的概率；但由于其不含核
酸酶 endA1 突變，體內(nèi)核酸酶含量較高，提取質(zhì)粒時務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中的去蛋白液以去除
核酸酶。

產(chǎn)品簡介

MG1655 化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)

HB101 菌株是 E. coli K-12 菌株和 E. coli B 菌株的雜合產(chǎn)物（同時也是 Stbl3 的原始菌株）。該菌株

攜帶 recA13 突變，可有效抑制長片段末端重復(fù)區(qū)的重組，降低錯誤重組的概率；但由于其不含核

酸酶 endA1 突變，體內(nèi)核酸酶含量較高，提取質(zhì)粒時務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中的去蛋白液以去除

核酸酶。hsdS20 背景使 HB101 缺失內(nèi)切酶系統(tǒng)，增強(qiáng)了外源 DNA 的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量；此菌株具

有鏈霉素抗性；不存在 lacIqZΔM15，不可用于藍(lán)、白斑篩選。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測，HB101 感

受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107 cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

MG1655 化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)

組分 CC96174-01 CC96174-02 CC96174-03

HB101

化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- mcrB mrr hsdS20 (rB- mB- ) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20 (StrR) glnV44 λ-

存儲條件

-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

MG1655 化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)

質(zhì)量控制

無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保.高轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。