詳細介紹
DB3.1 化轉克隆感受態
產品簡介
本公司生產的大腸桿菌 DB3.1 細胞含有 gyrA462 基因,對 λ 噬菌體的 ccdB 基因產物的毒性具有抵
抗作用,特別適用于轉化和擴增包含 ccdB 基因的質粒載體。使用 pUC18 質粒檢測,轉化效率可達
107 cfu/μg DNA.,-80 ℃ 保存幾個月轉化效率不發生改變。每支感受態可以酌情分裝使用,降低
了實驗的成本。質量穩定,使用方便,質優價廉。
產品組成
組分 CC96182-01 CC96182-02 CC96182-03
DB3.1 感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- gyrA462 endA1 Δ(sr1-recA) mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-) supE44ara-14 galK2 lacY1 proA2
rpsL20(SmR) xyl-5 λ- leu mtl1
DB3.1 化轉克隆感受態
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
產品特性
- DB3.1 感受態細胞具有鏈霉素抗性
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
DB3.1 化轉克隆感受態
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保。高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。