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改良Ames試驗(yàn)

工作原理：在開發(fā)該試驗(yàn)時(shí)，對標(biāo)準(zhǔn)的Ames致突變性試驗(yàn)進(jìn)行了修改，以對主要導(dǎo)致石油的致突變性和致癌性的一類化合物，多環(huán)芳香化合物（PAC）提供大的敏感性。使用改良的致突變性試驗(yàn)對小鼠皮膚繪畫生物測定中已評(píng)估的一系列油進(jìn)行了測試，并通過劑量反應(yīng)的回歸分析對其致突變性反應(yīng)進(jìn)行了量化。然后將這些分析得出的斜率（稱為致突變指數(shù)或MI）與根據(jù)皮膚繪畫生物測定中的腫瘤反應(yīng)計(jì)算的類似致癌性指數(shù)（CI）相關(guān)聯(lián)。由此導(dǎo)出的標(biāo)準(zhǔn)曲線用于建立MI閾值，在該閾值之上，預(yù)計(jì)油將在皮膚噴漆試驗(yàn)中顯示出統(tǒng)計(jì)上顯著的致癌活性。由于MI和CI之間的相關(guān)性成立，因?yàn)橛偷闹峦蛔冃院椭掳┬栽诤艽蟪潭壬希ㄈ绻皇堑脑挘┯?span>PAC介導(dǎo)，因此改良Ames試驗(yàn)的適用性僅限于含有這些化合物的試驗(yàn)材料。這一類別包括煉油廠物流，以及使用過的或再精煉過的油、煤焦油和油，以及構(gòu)成部分此類材料的配方產(chǎn)品，前提是配方中不存在干擾測試性能或解釋的成分。

終點(diǎn)：改良Ames試驗(yàn)的終點(diǎn)是致突變性指數(shù)或MI。它是使用線性回歸分析確定的致突變性劑量反應(yīng)曲線的斜率。對于高度精煉的油，MI可以從零到某些催化裂化原料的大于1200。

MI的解釋：在小鼠皮膚繪畫生物測定中，MI與皮膚致癌潛力的相關(guān)性表明，大多數(shù)MI大于1.0的油是致癌的，而大多數(shù)MI小于1.0的油不是致癌的。后一種規(guī)范的例外是一類被稱為亮漿提取物或殘留芳香提取物的油，要在歐盟認(rèn)證為非致癌物質(zhì)，其MI必須小于0.40。

后勤：我們希望提交用于改良Ames測試的樣本不大于25 ml。確定MI的小樣本量為0.2 ml，但如果將已知體積的油預(yù)先計(jì)量到適合使用相對于樣本量五倍體積的DMSO進(jìn)行提取的容器中，則可從0.05 ml的樣本中獲得有限的數(shù)據(jù)。化驗(yàn)周轉(zhuǎn)時(shí)間取決于工作量，但當(dāng)贊助商要求快速獲得結(jié)果時(shí)，我們通常可以提供每周7天的測試和報(bào)告服務(wù)，不收取額外費(fèi)用。測試完成后，以MI的形式將結(jié)果通過電子郵件提供給主辦方。詳細(xì)的書面報(bào)告（也通過電子郵件發(fā)送）通常在一兩個(gè)月內(nèi)完成，但也可以根據(jù)需要快速提供。報(bào)告的紙質(zhì)副本可應(yīng)要求提供。我們歡迎有關(guān)定制報(bào)告格式或數(shù)據(jù)分析的咨詢，并很樂意提供關(guān)于修改的Ames測試或其他測試的使用和解釋的教程，作為我們咨詢服務(wù)的一部分。

工作成果：PetroLabs嚴(yán)格按照ASTM方法E 1687 10進(jìn)行改良Ames試驗(yàn)。根據(jù)該方案，我們在每次測定中測試參考油（陽性對照）的全劑量范圍，以確保所用S-9制劑的代謝性能在可接受的歷史范圍內(nèi)。我們自豪地為贊助商提供了明確的MI數(shù)據(jù)。如果給定試驗(yàn)的任何控制參數(shù)超出范圍或致突變性的劑量-反應(yīng)曲線不能很好地?cái)M合（例如，活性材料的R^2<0.90），我們將重復(fù)試驗(yàn)，無需額外費(fèi)用。我們按照嚴(yán)格的科學(xué)標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐進(jìn)行改良Ames試驗(yàn)，但我們不遵守良好實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐（GLP）指南的所有文件和質(zhì)量保證規(guī)定。因此，目前，我們的研究僅用于贊助商信息，如果相關(guān)機(jī)構(gòu)要求全遵守GLP，則不適用于監(jiān)管提交。

 

 

 

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