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產品貨號	產品名稱	品牌
11363735001	Hybridoma Fusion and Cloning Supplement	life-ilab

 

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11363735001 羅氏

雜交瘤融合和克隆補充

 

 分析證書（COA） 公告（PDF）

貨號與規格    庫存       包裝規格       安全性

價格（CNY） 數量             

11363735001

 

需要從國外調貨，預計到貨時間2020年7月6日- 詳情     10毫升  

安全數據表   

相關類別       雜交瘤媒體補充劑， 雜交平臺， ITS等補品， 無血清培養基， 細胞培養，

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形成      解

打包      pkg 10毫升（50x）

制造商 沒有。    羅氏

運入      干冰

儲存溫度      −20°攝氏度

 

產品描述

一般說明

培養基補充劑，由白蛋白，胰島素，轉鐵蛋白，細胞因子，膽固醇源，其他定義的有機和無機化合物以及胎牛血清組成（終濃度：0.5％）。

HFCS包含人類蛋白質。已對從中分離出人類蛋白質的原料進行了乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和HIV-1 / 2抗體測試，發現呈陰性（根據當前的質量控制程序）。

 

應用

雜交瘤融合和克隆補充劑（HFCS）被用作正常培養基的補充劑，以支持融合后和克隆過程中B細胞雜交瘤的生長。HFCS替代飼養細胞。解凍儲存在液氮中的細胞后，它還可用于優化雜交瘤細胞的生長。[1] [2]

 

物理形態

溶液（50x濃縮，pH 7.4）；通過孔徑為0.2μm的膜過濾

 

準備說明

工作濃度： HFCS（50x）用基礎培養基稀釋為1:50（v / v）。強烈建議您使用RPMI1640。終培養基也應包含L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉。

 

分析筆記

生物活性：測定了雜交瘤細胞系的高克隆效率。

 

其他注意事項

僅用于生命科學研究。不可用于診斷。

 

Hybridoma fusion and cloning supplement              （HFCs）（50×）              媒體補編              Solution（50×concentrated）

Cat. No. 011 363 735 001 y Version 18

Content version: March 2016   10 ml

產品描述              綜述雜交瘤融合和克隆補充（HFCS）是一種              低血清含培養基補充              胎牛血清（FCS）的替代              雜交瘤細胞。              HFCS是專門為優化細胞生長而設計的              低血清細胞培養中新融合雜交瘤的篩選和克隆              媒體。              HFCS的特殊組成進一步避免了              使用飼養細胞的必要性。              成分培養基補充劑，包括白蛋白、胰島素，              轉鐵蛋白，細胞因子，膽固醇來源，其他              界定的有機和無機化合物與胎兒              小牛血清（終濃度：0.5%）。              HFCS含有人類蛋白質。原料來自              人類的蛋白質被分離出來              乙肝表面抗原檢測              （HBsAg）以及HIV-1和HIV-2抗體和              發現是陰性的。              生物學的              活動              每一批都要進行高克隆效率的檢測              雜交瘤細胞（見圖1）。              配方•溶液（50×濃度，pH7.4）；              •通過0.2 m孔徑膜過濾；              •內毒素（LAL）：10 EU/ml，檢測支原體              工作              濃度              HFCS濃縮液（50×）用1:50（v/v）稀釋              基本培養基。強烈建議使用RPMI              1640年。終培養基還應含有L-谷氨酰胺和

-巰基乙醇。              應用HFCS是一種血清替代物，含有FCS和              血清白蛋白、胰島素、轉鐵蛋白、細胞因子、膽固醇源和其他特異性              有機和無機化合物。              HFCS避免了血清在細胞培養中的額外使用              新融合雜交瘤生長培養基              源自SP 2/0，P3X63Ag8.653。              HFCS的特殊組成進一步避免了              飼養細胞的使用。新融合的生長速度              HFCS輔助培養基中的雜交瘤細胞是              比人內皮細胞要高得多              培養上清液（HECS）-或補充的FCS              中等。雜交瘤HFCS克隆方法的研究              補充培養基比補充培養基更有效率（圖1）。              工具包存儲/              穩定性              未開封溶液在1525°C下穩定，直到              標簽上的有效期。              注：建議配制適當的等份，避免反復凍融

 

 

程序和所需材料              推薦              媒體              配方              請在下表中找到推薦的              小鼠源性培養基配方              雜交瘤。              1每種培養基配方可能含有進一步的補充劑，例如抗生素、L-谷氨酰胺-              巰基乙醇丙酮酸鈉，非必需              氨基酸。              2含氨基蝶呤的帽子中氨基蝶呤的濃度              介質可以通過使用              分離濃縮試劑[補充羥色胺培養基；氨基蝶呤（250×）]。這樣就可以稀釋氨基蝶呤。              3.雜交瘤從含血清培養基轉移到無血清培養基              NUTRIDOMA-SP（需要斷奶）（見              備注4）。              4建議將NUTRIDOMA-SP用于SP 2/0              衍生性雜交瘤。              階躍介質配方              高血清1低血清1游離血清1              融合•任何基底              中等（例如。，              RPMI 1640）              •未來作戰系統（用于              再懸浮              之后的細胞              融合）              任何基礎培養基（如RPMI 1640）              冷凍•含FCS              •10%二甲基亞砜（v/v）              選擇2•任何基礎              中等（例如。，              RPMI 1640）              •10%未來作戰系統（v/v）              •10%BM              條件H1              （伏/伏）              •HAT介質補充，1×              •任何基底              中等（例如。，              RPMI 1640）              •1×HFCS              •HAT介質補充，1×              •任何基底              中等（例如。，              RPMI 1640）              •1個NUTRIDOMA-CS              •HAT介質補充，1×              篩選•參見選擇              克隆•任何基礎              中等（例如。，              RPMI 1640）              •10%未來作戰系統（v/v）              •10%BM              條件H1              （伏/伏）              •任何基底              中等（例如。，              RPMI 1640）              •1×HFCS              •任何基底              中等（例如。，              RPMI 1640）              •1個NUTRIDOMA-CS              雜交瘤              文化              •任何基底              中等（例如。，              RPMI 1640）              •10%未來作戰系統3（v/v）              •RPMI 1640型/              DMEM（1:1）              •0.5–1%FCS3              （伏/伏）              •營養學              •RPMI 1640型/              DMEM（1:1）4              •NUTRIDOMASP 1%

 

選擇成功后介紹              陽性組織培養上清液已通過第yi次篩選，下一步是克隆              產生抗體的細胞。單細胞克隆確保              產生感興趣抗體的細胞              單克隆抗體的分泌              保持穩定。              單細胞克隆有幾種方法，例如。，              通過限制稀釋，在軟瓊脂中生長，流式細胞術。              限制稀釋法克隆單細胞              如下所示。              盡管如此，每一次嘗試都是為了確保              在電鍍之前，電池處于單電池懸浮狀態              不能保證殖民地不會出現              從兩個粘在一起的牢房里。因此，限制性稀釋克隆少應該做兩次              （“再克隆”）產生克隆種群。              處理              說明              •如果許多雜交瘤必須同時克隆              時間，可能值得用              使用10毫升或更大的吸管。一滴就夠了              吸管將輸送大約100微升。              •克隆將在4天后開始出現，并且應該              準備在第7-10天開始放映。              •可以從包含多個              克隆體以及僅包含單個              克隆人。              程序請參考下表。              注：雜交瘤應健康迅速              在克隆時生長的。

 

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