詳細介紹
DNA的性質
核酸是包含生物分子的信息,它由幾個基本組成部分組成:糖(RNA時為核糖; DNA時為脫氧核糖),磷酸鹽和腺嘌呤,鳥嘌呤,胞嘧啶和胸腺嘧啶的四個堿基(RNA胸腺嘧啶被Uracil取代)。糖和磷酸鹽形成了連接A,C,G,T或U堿基的骨架。堿基序列是生物生物學信息的基本代碼。因此,為了翻譯成蛋白質的氨基酸序列,將堿基一起分成稱為密碼子的三聯體(共有64(43)個可能的三聯體或密碼子)。該遺傳密碼對于所有已知的生物都是通用的。它的特性和趨勢是當今生物技術行業的驅動力。
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核酸的di一個*特征是其攜帶信息的能力。第二個特征是形成特定的反平行異質雙鏈體。這基于腺嘌呤可以與胸腺嘧啶(或RNA中的尿嘧啶)形成對,而鳥嘌呤可以與胞嘧啶形成對的可能性。堿基配對能力是相同復制,信息交換和信息運輸以及通過用互補核酸探測特定序列進行鑒定的原因。
合成DNA及其一些應用
一些傳統上重要的應用是用于雜交的探針(用于確認特定靶序列的存在),用于DNA測序和/或PCR的引物,用于分子結構研究的DNA或RNA以及用于定點誘變的DNA片段。
在自動合成儀上構建寡核苷酸的化學過程中,有幾個關鍵要素。
先,起始單體必須包含一個不同的偶聯位點。其他可能的結合位點必須通過保護基團有效地封閉。起始單體通常為固體載體如琥珀酰CPG的形式。
必須添加要偶聯的di一單體。像起始單體一樣,它必須被除偶聯位點以外的保護基團有效地封閉。當然,下一個單體將要連接的位點也必須受到保護,并在磷位點(如亞磷酰胺)上具有化學活性。
必須在適當的條件下允許偶聯,并且必須隔離新合成的二聚體,并且必須除去其他所有物質。
二聚體與下一個單體的偶聯位點必須脫保護而不影響任何其他保護基。
再次必須分離現在脫保護的二聚體,然后必須添加下一個單體,依此類推。
一旦完成適當長度的合成,就必須從產物上切下所有保護基,并從支持物上切下產物,以產生具有生物活性的DNA。
在自動綜合中,這些提到的步驟分解如下:
- 去三苯甲基化
- 耦合
- 封蓋
- 氧化作用
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