詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:禽肺病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Avian Pneumovirus (APV)RTPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅用于科研運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
相關(guān)產(chǎn)品:
卡薩諾爾森林病病毒PCR檢測(cè)試劑盒Kyasanur Forest Disease Virus(KFDV)RTPCR
唾液乳suan桿菌PCR檢測(cè)試劑盒Lactobacillus salivariusPCR
乳suan乳球菌PCR檢測(cè)試劑盒Lactococcus lactis PCR
乳suan桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒Lactococcus spp. PCR
拉沙熱病毒PCR檢測(cè)試劑盒Lassa Fever Virus(LASV)RTPCR
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase, CYP21A Elisa Kit癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3ELISA試劑盒 OIT3免費(fèi)代測(cè)試劑
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Human indoleamine 2, 3-dioxygenase, IDO Elisa Kit癌抗原27-29ELISA試劑盒 CA 27-29免費(fèi)代測(cè)試劑
Human serine protease, PRSS Elisa Kit癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子1ELISA試劑盒 CEACAM1免費(fèi)代測(cè)試劑
Human spleen tyrosine kinase, Syk Elisa Kit癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子6ELISA試劑盒 CEACAM6免費(fèi)代測(cè)試劑
Human serine/threonine protein kinase, STK Elisa Kit癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子7ELISA試劑盒 CEACAM7免費(fèi)代測(cè)試劑
Human ierleukin receptor associated kinase, IRAK Elisa Kit癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8ELISA試劑盒 CEACAM8免費(fèi)代測(cè)試劑
Human urokinase, UK Elisa Kit癌胚鐵蛋白ELISA試劑盒 CEF免費(fèi)代測(cè)試劑
Human phosphoenolpyruvate carboxykinase, PCK Elisa Kit 癌調(diào)蛋白2ELISA試劑盒 OCM2免費(fèi)代測(cè)試劑
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Human β-site APP-Cleaving Enzyme 1, 1BACE1 Elisa Kit癌癥促凝素ELISA試劑盒 CP免費(fèi)代測(cè)試劑
Human Protein disulfide-isomerase precursor, PDI Elisa Kit艾杜糖-2-硫suan酯酶ELISA試劑盒 IDS免費(fèi)代測(cè)試劑
禽肺病毒PCR檢測(cè)試劑盒脂蛋白酯酶(LPL)比色法檢測(cè)試劑盒脂肪suan代謝系列100管/48樣微量法
脂蛋白酯酶(LPL)比色法檢測(cè)試劑盒脂肪suan代謝系列50管/24樣可見分光光度法
ATP檸檬suan裂解酶(ACL)比色法檢測(cè)試劑盒脂肪suan代謝系列100管/96樣微量法
ATP檸檬suan裂解酶(ACL)比色法檢測(cè)試劑盒脂肪suan代謝系列50管/48樣紫外分光光度法
血清高密度脂蛋白(HDLC)比色法檢測(cè)試劑盒脂肪suan代謝系列100管/96樣微量法
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。