玩轉免疫親和小柱
霉菌毒素是由霉菌產生的有毒代謝產物,有較強的致癌性和降低免疫力作用。常見的霉菌毒素主要有黃曲霉毒素、赭曲霉毒素,嘔吐毒素、單端孢霉烯(T-2毒素)、玉米赤霉烯酮、串珠鐮刀菌素、伏馬菌毒素等。糧食及飼料很容易受到霉菌毒素的污染,這一問題越來越成為現代農業生產中不可忽視的重大難題。
月旭科技利用其強大的科研力量和先進的生產工藝開發出了一系列霉菌毒素免疫親和柱產品,該系列產品通過了多次科學實驗的檢驗,得到了多個guan方檢測機構的認證,并廣泛適用于各檢測實驗室、進出口機構等。
一般一支完整的免疫親和柱由6部分組成:
• 柱管(1mL/3mL)
• 固定相(瓊脂糖凝膠)
• 抗體(瓊脂偶聯特異性抗體)
• 保護液(通常是緩沖溶液保持瓊脂潤濕)
• 篩板以及上下頂蓋(防止柱液流失)
免疫親和柱技術即免疫親和層析技術,屬于樣品前處理過程中一種簡化樣品提取過程,有效提高樣品純度的凈化技術,由于其特異性強在食品分析中屬于痕量檢測,檢測限非常低。Welchom®免疫親和柱用于從樣品中分離、純化真菌毒素,基于抗原與抗體之間的特異性反應。免疫親和柱中的抗體通過共價鍵作用懸浮在凝膠中,特異性吸附樣品中的真菌毒素。如果供檢測的樣品中含有真菌毒素,樣品通過免疫親和柱時,毒素被抗體捕捉結合。所有其他物質,被從免疫親和柱中清洗出去。甲醇作為洗脫液,將真菌毒素將抗體上洗脫。
使用前先將親和柱恢復至室溫,放掉柱子的保護液,然后進行上樣、淋洗、洗脫過程。
1)上柱的樣品溶液應該保持酸堿中性、無懸浮物、甲醇濃度不宜過高;
2)樣品為復雜樣品時(如高蛋白、高油脂、酸性樣品),可將提取液分兩次提取樣品,提高提取效果;
3)樣品過柱及甲醇洗脫速度要慢且均勻,約每秒1-2滴;
4)抗原抗體發生反應的最佳溫度是在25℃左右,實驗需要的環境溫度最好是室溫24℃-28℃,太高或太低的溫度都會對親和柱的回收率有一定的影響。親和柱在使用前需要恢復至室溫再進行實驗;
5)親和柱不要在無水狀態下,瓊脂容易干燥wei縮,影響親和柱的質量;
6)親和柱儲存條件為4℃-8℃。切記0℃以下的低溫,因為緩沖液凍結,會嚴重影響親和柱內的物理結構,對親和柱的質量影響很大;
7)洗脫一般選擇試劑甲醇,為增強洗脫效果可加大甲醇體積;
8)樣液免疫親和柱凈化后,洗脫液過0.45μm或更小孔徑濾膜效果更好。