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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 40000 U（40 KU） |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 10301ES40 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
本品主要適用于標記RNA 3’-末端，環化RNA和DNA寡聚核苷酸以及克隆cDNA等核酸操作。
產品介紹
產品信息
產品名稱
產品編號
規格
價格（元）
Hieff® Quick T4 DNA Ligase (400 U/µL)
10301ES40
40000 U (40 KU)
446.00
產品描述Hieff® Quick T4 DNA Ligase是一款可用于NGS建庫過程中DNA片段和接頭連接的單酶產品，該產品已經過高通量測序驗證，質量優異。對于無需進行體系調整的客戶，推薦選購Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607）。
產品組分組分編號
組分名稱
規格
10301-A
Hieff® Quick T4 DNA Ligase (400 U/µL)
100 µL
10301-B
10 × T4 DNA Ligase Buffer
250 µL
運輸和保存方法
冰袋運輸，-20℃保存，有效期2年。
單位定義
在20 μL的連接反應體系中，6 μg的λDNA-Hind Ⅲ分解物在16℃下反應30 min時，催化50%以上的DNA片段發生連接所需要的酶量定義為1個活性單位(U)。
注意事項
1）Buffer在融解時，如果出現少量沉淀屬正常現象，請顛倒混勻后使用。2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3）本產品僅作科研用途！使用方法
1.目前主流的合并法DNA建庫試劑盒，其末端修復和加A處理后一般不純化，直接進行接頭連接。本試劑盒可與主流的商業化末端修復加A體系兼容，進行接頭連接。反應體系請參考如下配制，渦旋瞬離后置于20℃，反應15 min即可。
表1. Adapter Ligation體系
名稱
體積（μL）
dA-tailed DNA
60
10 × T4 DNA Ligase Buffer
10
50% PEG6000
10*
DNA Adapter
X**
Hieff® Quick T4 DNA Ligase
1-5***
ddH2O
To 100
【注】：*試劑盒內未提供50% PEG6000，需自行準備。
**接頭用量參考表2。
***Hieff® Quick T4 DNA Ligase用量可根據需要添加1-5 μL。
2. Adapter的質量和使用濃度直接影響連接效率及文庫產量。Adapter用量過高可能會產生較多Adapter Dimer，用量較低可能會影響連接效率及文庫產量。表2列舉了使用本試劑盒，不同Input DNA量推薦的Adapter使用量。
表2. 500 pg-1 μg Input DNA推薦的Adapter使用濃度
Input DNA
Adapter : Input DNA摩爾比
Input DNA
Adapter : Input DNA摩爾比
1 μg
10:1
50 ng
100:1
500 ng
20:1
25 ng
200:1
250 ng
40:1
1 ng
200:1
100 ng
100:1
500 pg
400:1
【注】：Input DNA摩爾數（pmol）≈ Input DNA質量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均長度（bp）]。
【接頭添加計算舉例】：當Input DNA為100 ng，Input DNA長度為300 bp時，接頭應該添加多少？
第一步，計算Input DNA摩爾數。公式：Input DNA摩爾數（pmol）≈ Input DNA質量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均長度（bp）]；
Input DNA摩爾數（pmol）=100 ÷（0.66×300）=0.5 pmol；
第二步，計算接頭添加摩爾數。根據表2查詢接頭添加比例；
根據表2，查得Input DNA 100ng時接頭添加比例100:1，則接頭添加摩爾數=100×0.5 pmol=50 pmol；
第三步，計算接頭添加體積。接頭濃度=15 μmol/L（如使用其他接頭，濃度需要依據其他接頭濃度參數）；
接頭添加體積=接頭添加摩爾數（50 pmol）÷接頭濃度（15 μmol/L）=3.34 μL（注：15 μmol/L=15 pmol/μL）
綜上，接頭可添加3.4 μL。（注：接頭最大加入體積不超過5 μL）
相關產品產品名稱
貨號
規格
價格（元）
Hieff NGS®MaxUp II DNA Library Prep Kit for Illumina
12200ES08/24/96
8/24/96 T
2456/6486/23567
Hieff NGS® Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module
12608ES24/96
24/96 T
2066/6166
Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module
12607ES08/24/96
8/24/96 T
1423/3263/10863
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1
12615ES04/16
12×4/12×16 T
1256/4536
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 2
12616ES04/16
12×4/12×16 T
1256/4536
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 3
12617ES04/16
12×4/12×16 T
1256/4536
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 4
12618ES04/16
12×4/12×16 T
1256/4536
2×Super Canace® Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification
12621ES24/96
24/96 T
583/1783
Hieff NGS® DNA selection Beads（Superior Ampure XP alternative）
12601ES08/56
5/60 mL
986/6286
dsDNA HS assay kit for Qubit®
12640ES60/76
100/500 T
686/2696
HB210722
