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標簽:大鼠乳鼠成骨細胞大鼠乳鼠成骨細胞培養培養可以:(1)獲得大鼠乳鼠成骨細胞;(2)用于骨修復的細胞學機制研究。實驗方法酶消化法實驗方法原理取材于出生2~3d小鼠顱骨,以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養,采用膠原酶消化法分離成骨細胞,并進行細胞接種與傳代。采用膠原酶消化法分離培養成骨細胞是一種可靠、簡便、快速的細胞原代分離培養方法。實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒F12*培養液胰蛋白酶Ⅱ型膠原酶酒精儀器、耗材手術器械磁力攪拌器實驗步驟一、實驗步驟1.拉頸處死24小時內新生的SD大鼠,75%
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標簽:光學顯微鏡檢測腫瘤細胞形態光學顯微鏡檢測腫瘤細胞形態可以:(1)輔助判斷腫瘤細胞是否凋亡;(2)用于病理檢查;(3)提取腫瘤細胞微細結構信息。詳細實驗方法瑞氏-吉姆薩混染法HE染色法實驗方法原理吉姆薩染液由天青,伊紅組成。染色原理和結果與瑞特染色法基本相同。1)嗜酸性顆粒為堿性蛋白質,與酸性染料伊紅結果,染粉紅色,稱為嗜酸性物質;2)細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍或天青結合,染紫藍色,稱為嗜堿性物質;3)中性顆粒呈等電狀態與伊紅和美藍均可結合,染淡紫色,稱為中性物質。PH對
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標簽:小鼠肝細胞原代培養小鼠肝細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法胰酶消化法實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEM無血清DMEM培養基胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布剪子鑷子燒杯平皿研磨玻片濾網離心管6孔培養板吸管移液管手套微量加樣器實驗步驟一、實驗材料準備1.動物:小鼠。2.試劑:DMEM(含血清)、無血清
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細胞技術專題:腫瘤細胞侵襲試驗(Tumour Invasion Assay)
一、原理Matrigel是從小鼠EHS肉瘤中提取的基質成分,含有LN、IV型膠原、接觸蛋白和肝素硫酸多糖,鋪在無聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯濾膜上,能在DMEM培養基中重建形成膜結構,這種膜結構與天然基質膜結構極為相似。濾膜孔徑一般為8um,而且膜孔都被Matrigel覆蓋,細胞不能自由穿過,必須分泌水解酶,并通過變形運動才能穿過這種鋪有Martrigel的濾膜,這與體內情況較為相似。鋪有Martrigel的濾膜放在以BlindWell腔或MICS腔上下室之間,鋪有Martrigel面朝向上室,在下 -
材料:6孔板marker筆直尺20微升槍頭(滅菌)無血清培養基PBS準備:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內)流程:1、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻地劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。2、在空中加入約5X105個細胞,具體數量因細胞不同而不同,掌握為夜能鋪滿。3、第二天用槍頭比著直尺,盡量垂直于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不要傾斜。4、用PBS洗細胞3次,去除劃下的細胞,加入無血清培養基。5、放入
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概念:細胞克隆形成率即細胞接種存活率,表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數量。貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆,而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。基本步驟:1、取對數生長期的各組細胞,分別用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成單個細胞,并把細胞懸浮在10%胎牛血清的DMEM培養液中備用。2、將細胞懸液作梯度倍數稀釋,每組細胞分別以每皿50、100、200個細胞的梯度密度分別接種含10mL37℃預溫培養液的皿中,并輕輕轉動,使細
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標簽:細胞周期體外培養周期測定細胞周期測定可以:(1)作為生物相容性評價指標;(2)用于研究細胞凋亡;(3)作為選擇細胞的依據。詳細實驗方法細胞計數法BrdU滲入法流式細胞儀測定法實驗方法原理體外培養細胞生長、分裂繁殖的能力,可用分裂指數來表示。它與生長曲線有一定的,如隨著分裂指數的不斷提高,細胞也就進入了指數生長期。分裂指數指細胞群體中分裂細胞所占的百分比,它是測定細胞周期的一個重要指標,也是不同實驗研究選擇細胞的重要依據。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰酶甲醇培養液冰醋酸Giemsa染液儀器、耗材
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標簽:大鼠主動脈內皮細胞細胞培養大鼠血管內皮細胞培養可以:(1)用于血液流動性、防止血栓形成、調節血管張力等研究;(2)用于選擇性通透性以及免疫調節等方面研究。實驗方法貼塊法實驗方法原理貼塊法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養,其方法較酶消化法簡便、經濟。但缺點使易混有成纖維細胞和平滑肌細胞,前者的貼壁時間和內皮接近,后者貼壁較內皮慢,而且會被肝素所抑制。實驗材料雄性Wistar大鼠試劑、試劑盒DMEM胎牛血清內皮細胞生長因子肝素鈉青鏈霉素明膠胰蛋白酶PBSD-Hanks’液儀器