国产一卡2卡三卡4卡麻豆_了解最新日韩草逼视频_h片在线播放一区_国产激情影视在线_好了av四色综合无码久久_欧美黑白双插OOR720P_日本精品中文字幕在线_秋霞午夜手机影院_亚洲国产一区二区3da毛片_欧美杂交深喉video中文字幕

上海北諾生物科技有限公司

中級會員·13年

聯系電話

15800960770

您現在的位置: 首頁> 技術文章 > 細胞技術專題:腫瘤細胞的軟瓊脂集落培養實驗
中級會員·13年
人:
周經理 劉經理
話:
021-57730393
機:
15800960770
真:
86-021-61496710
址:
上海市徐匯區宜山路520號中華門大廈18樓D座
化:
www.bnbiotech.com
址:
www.bnbiotech.com

掃一掃訪問手機商鋪

細胞技術專題:腫瘤細胞的軟瓊脂集落培養實驗

2014-2-20  閱讀(1367)

分享:

標簽: 腫瘤 軟瓊脂 集落

在體外培養基中由一個祖先細胞增殖形成的細胞團,稱之為集落。腫瘤細胞能無限繁殖,所以具有這種能力,而成熟分化的細胞則不能形成集落。

實驗方法

  • 基本方案
實驗方法原理HL-60細胞是一種急性早幼粒細胞白血病細胞,在體外無需加刺激因子,可在軟瓊脂培養基中形成集落。二甲基亞砜是一種細胞分化誘導劑,經二甲基亞砜處理后的HL-60細胞按粒系途徑定向成熟分化,同時細胞的增殖力降低,幾乎全部細胞喪失了軟瓊脂中形成集落的能力。因此,這種方法可用于細胞分化的基礎研究和臨床腫瘤治療的療效檢驗等方面。
實驗材料

HL-60細胞

試劑、試劑盒

小牛血清 RPMI1640培養液 臺盼蘭 瓊脂 二甲基亞砜

儀器、耗材

超凈工作臺 二氧化碳培養箱 顯微鏡 培養瓶 吸管 酒精燈 血細胞計數板 多孔培養板

實驗步驟

1.  收集對數生長期的HL-60細胞,先按實驗十三測定細胞活力,然后調整細胞濃度,制成300~1 000活細胞/ml 的細胞懸液。


2.  取二個培養瓶每個瓶中加9 ml 調整好濃度的細胞懸液,然后各加入1 ml 3%瓊脂(已融化,在65℃水浴中放置),迅速加入,混勻。


3.  用微量加樣器吸140 μl 二甲基亞砜(MDSO),加到一個瓶中,充分混勻,為實驗組,另一瓶不加DMSO,為空白對照組。


4.  取一個16 mm 多孔培養板,每孔加1 ml(35 mm 培養皿需加2 ml)細胞瓊脂懸液,勿有氣泡,將實驗組和對照組分兩組加好,蓋上蓋并作好標記。


5.  在室溫放置20分鐘使細胞瓊脂懸液凝固。

 

6.  然后移培養板或平皿于CO2培養箱中37℃進行培養。


7.  培養7~10天,肉眼觀察并計數細胞集落。


8.  結果:以肉眼可見的細胞團(含500個以上細胞)作為計數集落的標準。對照組HL-60細胞在含0.3%的軟瓊脂培養基中生長良好,每個孔中可見有多個集落形成,而實驗組HL-60細胞因經二甲基亞砜誘導分化,細胞在軟瓊脂中的集落形成明顯減少。


9.  集落的計數和計算:


(1)集落數=n孔中細胞集落數總和/n孔


(2)集落形成率=集落數/接種培養細胞總數×100%

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
產品對比 二維碼 在線交流

掃一掃訪問手機商鋪

對比框

在線留言
主站蜘蛛池模板: 绥德县| 隆安县| 澳门| 海安县| 永靖县| 颍上县| 普安县| 聂拉木县| 永安市| 达日县| 工布江达县| 潼南县| 封开县| 巴彦淖尔市| 新平| 大渡口区| 井冈山市| 同仁县| 招远市| 延边| 霍林郭勒市| 灵台县| 拉孜县| 惠州市| 和田市| 云南省| 湖口县| 武清区| 富顺县| 侯马市| 大关县| 阿坝县| 阿荣旗| 交口县| 栾川县| 静海县| 铁岭市| 彩票| 金平| 安吉县| 虎林市|