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目的要求:
1.掌握甾體皂苷元(親脂性和中性成分)的提取方法。
2.熟悉薯蕷皂苷元的性質及鑒定法。
簡介:
薯蕷皂苷元(Diosgenin)是一種甾體皂苷元,分子式(C27H42O31),分子量414.61,為白色結晶,mp204~207℃,[ ]25D-129.3(CHCl3),溶于一般有機溶劑和醋酸,不溶于水。目前,是制造多種甾體藥物如口服避孕藥(I號,II號避孕藥片)和甾體激素(如可的松)等的重要原料。在植物界主要分布在薯蕷科薯蕷屬(Dioscorea)植物中,我國的薯蕷屬植物有80余種,其中只有薯蕷根莖組(Stenophora)的17種、I亞種及一變種才含有甾體皂苷元,其它則含有多量淀粉,無皂苷元。已用于生產的主要有盾葉薯蕷(D.Zingiberensis C. H. Wright),穿龍薯蕷(D.nipponica Makino),黃山藥(D.panthaica prain et Burkil),紫黃姜(D.nipponica Makinovar rosthani prain et Burk)等。在植物體內薯蕷皂苷元是與葡萄糖、鼠李糖結合成薯蕷皂苷(Dioscin)而存在。提取分離時,一般是先用稀酸將薯蕷皂苷水解成薯蕷皂苷元與單糖(葡萄糖、鼠李糖)。因薯蕷皂苷元不溶于水,混存于植物殘渣中,故可用有機溶劑(如石油醚)直接從植物殘渣中提取出薯蕷皂苷元。
提取方法
1.皂苷預試:
2.薯蕷皂苷元的提取:
注一:檢查薯蕷皂苷元是否提盡,可用李伯曼反應,參考實驗二“注三”項下。
注二:回收石油醚的方法見實驗一“注四”項下。
注三:所得薯蕷皂苷元(粗品)用石油醚抽洗后,即可測定熔點,若熔點不合格時,才進行重結晶。
薯蕷皂苷元的鑒定
1.熔點測定:204~209℃
2.薄層層析鑒定:
應只呈現一個與標準Rf值一致的色斑。
樣品:白色結晶的無水醇液
標準品:薯蕷皂苷元無水醇液
1)吸附劑:AI2O3軟板(中性100~200目,活性Ⅲ級)
展開劑:苯一甲醇(9:1)
2)吸附劑:硅膠H-CMC硬板
展開劑:石油醚-乙酸乙酯(7:3)
顯色劑:10%磷鉬酸乙醇溶液。噴霧后加熱10~20分鐘
3)化學反應:
①Liebermann-Burchard反應
②CHCI3-濃H2SO4試驗
③五氯銻反應(Kahlenberg反應):與五氯銻的氯仿溶液呈紫藍色。
4)制備衍生物:
乙酰化物的制法:取樣品100mg溶于3ml吡啶中,加入20ml醋酐,煮沸半小時至一小時后,將反應物倒入冰水中(冬季操作使用冷水即可)。待析出白色晶體后,抽濾,析出物丙酮重結晶即得。mp196~193℃。
5)紫外吸收光譜的測定:
取樣品5mg,加入濃H2SO4 10ml,在40℃水浴上加熱1小時,放冷,測定。薯蕷皂苷元應有以下zui大吸收峰:
λmax 271nm 415nm 514nm
10gε 3.99 4.06 3.64