第三法
原理在酸性條件下溴化氰與吡啶聯苯胺發生顯色反
應，采用紫外-可見分光光度法測定H ib多糖衍生物中溴化
氰的含量。
試劑 （1 )6 0%的吡啶溶液量取吡啶30ml，加水
20ml，搖勻，即得。
(2)2%鹽酸溶液量取鹽酸0.5ml，加水9. 5ml，搖勻，
即得。
(3 )吡啶聯苯胺溶液取聯苯胺0.5g，精密稱定，加
60%吡啶溶液50ml使溶解，再加人2%鹽酸溶液10ml，搖
勻，即得。臨用前配制。
對照溶液的制備（1)0. 1 m g /m l溴化氰對照貯備液
取溴化氰10mg，精密稱定，加乙腈適量使溶解，加水稀釋
至100ml，搖勻，即得。臨用前配制。
(2 )溴化氰對照工作液（500ng/ml) 精密量取溴化氰對
照貯備液lm l，加水稀釋至200ml，搖勻，即得。
供試品溶液的制備取多糖衍生物適量，配制成lOmg/ml
的溶液，即得。
測定法量取吡啶聯苯胺溶液2. Oml，加水2. Oml，混
勻，2CTC以下、暗處放置1 5分鐘后，在波長520mn處測定
吸光度，作為空白對照。
量取供試品溶液2. O m l加吡啶聯苯胺溶液2. Oml, 混
勻，20X：以下、暗處放置1 5分鐘后，在波長520nm處測定
吸光度。
分別量取溴化氰對照工作液0.1ml、0.2ml、0.4ml、
0.6ml、0.8m l、1. Om l于試管中，每管依次加水1.9ml、
1.8ml、1.6ml、1.4ml、1.2ml、1.0ml，加人P比嗤聯苯胺溶
液2. Oml，混勻，20°C以下、暗處放置1 5分鐘后，在波長
520mn處測定吸光度。
結果計算以對照工作液中溴化氰的含量（ng/ml) 對其
相應的吸光度作線性回歸，求得線性回歸方程，將供試品溶
液的吸光度代人線性回歸方程，求得供試品溶液中溴化氰的
含量 B (n g/m l) 。
供試品中溴化氰的含量（ng/mg) = |
100
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