上海奧析科學儀器有限公司UV1901PC紫外分光光度計細胞色素C 活力測定法細胞色素C 活力測定法
試劑（1 )磷酸鹽緩沖液（0 .2 m o l /L ) 取磷酸氫二鈉
71. 6 4 g ,加水使溶解成1000ml，作為甲液。另取磷酸二氫
鈉27. 6 0 g ,加水使溶解成1000ml，作為乙液，取甲液81ml
與乙液1 9 m l ,混勻，調節p H 值至7. 3。
( 2 )磷酸鹽緩沖液（O .lm d /L ) 取磷酸鹽緩沖液
(0. 2mol/L)500ml,加水稀釋至 1000ml,調節 pH 值至 7. 3。
( 3 )磷酸鹽緩沖液（0.02mol/L) 取磷酸鹽緩沖液
(0. 2mol/L) 100ml, 加水稀釋至 1000ml, 調節 pH 值至 7. 3。
(4 )琥珀酸鹽溶液取琥珀酸與氫氧化鉀各4. 72g, 加
水使溶解成1 0 0m l,調節p H 值至7. 3。
(5 )qinhuajia 溶液取qinhuajia 0. 65g，加水使溶解成100ml
后，用稀硫酸調節p H 值至7. 3。
(6 )去細胞色素C 的心懸浮液取新鮮豬(牛）心2 只，除
去脂肪與結締組織，切成條，用絞肉機絞碎，置紗布兜中，
用水沖洗約2小時（經常攪動，擠出血色素），擠干，用水洗
數次，擠干，置磷酸鹽緩沖液（0. Im o l/L )中浸泡約1 小時，
擠干，重復浸泡1次，用水洗數次，擠干，置組織搗碎機內，
加磷酸鹽緩沖液(0.02md/L)適量恰使豬(牛）心浸沒，搗成勻
漿，離心10分鐘（普通離心機），取上層混懸液，加冰塊少
量，迅速用稀醋酸調節p H 值至約5 . 5 ,立即離心1 5分鐘，
166 .
取沉淀，加等體積的磷酸鹽緩沖液（0. lm o l/L ) ，用玻璃勻漿
器磨勻后，貯存于冰箱中；臨用時取1.0ml, 加磷酸鹽緩沖
液(0. lmol/L )稀釋至 10ml。
供試品溶液的制備取供試品，加水制成每lm l中含細
胞色素C 約3mg的溶液。
測定法取磷酸鹽緩沖液（0.2mol/L)5ml、琥珀酸鹽溶
液1.0ml與供試品溶液0 .5m l(如系還原型制劑，.應加人
O.Olmol/L鐵qinhuajia 溶液0_ 0 5 m l) ,置25ml具塞比色管中，
加去細胞色素C 的心懸浮液0. 5m l與qinhuajia 溶液1. Oml, 加
水稀釋至1 0 m l,搖勻，以同樣的試劑作空白，照紫外-可見
分光光度法（通則0401)，在550nm的波長處附近，間隔
0.5mn找出zui大吸收波長，并測定吸光度，直至吸光度不再
增大為止，作為酶還原吸光度；然后各加連二亞硫酸鈉約
5m g ,搖勻，放置約10分鐘，在上述同一波長處測定吸光
度，直至吸光度不再增大為止，作為化學還原吸光度；按下
式計算：
細胞色素C 活力=
化學還原吸光度
X100%
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