上海漢堯&熙華藥業
寡核苷酸類藥物的低殘留分析方法
實驗部分
結果討論
獲取進步
前言
寡核苷酸藥是一類由10～50個堿基構成的核苷酸類化合物，可以在RNA水平調控疾病相關基因的轉錄及翻譯過程。其分子量介于傳統小分子和大分子化合物之間，結構復雜，極性大，給相關的分析及質量研究工作帶來了挑戰。
目前，針對寡核苷酸藥物的色譜分析方法主要有陰離子交換色譜法、離子對色譜法以及毛細管電泳法等。但寡核苷酸藥物易與玻璃及金屬材質發生非特異吸附，導致嚴重的系統殘留，給分析工作帶來極大的挑戰。近期上海漢堯聯合熙華藥業使用YMC-BioPro QA-F色譜柱開發了一種基于離子交換原理的寡核苷酸藥物分析方法，旨在通過色譜柱及方法的優化，減少該類樣品在常規色譜儀器上的非特異吸附問題。同時該方法的專屬性、靈敏度、重復性優良，可以在不升級設備的前提下，直接用于寡核苷酸類藥物的常規分析檢測。
一
實驗部分
1
樣品
15-25個堿基對的短鏈寡核苷酸樣品
（由生工生物提供）
2
儀器及條件
高效液相色譜儀 | Agilent 1260 |
檢測器 | UV |
色譜柱 | YMC-BioPro QA-F (5μm, 100*4.6mm) |
YMC, P/N: QF00S05-1046WP
二
結果與討論
1
寡核苷酸混合對照品圖譜
圖1.15-25BP寡核苷酸混合對照品放大圖譜
（19BP和20個堿基對的寡核苷酸樣品未被有效分離）
2
殘留測試
圖2為50μg/ml寡核苷酸樣品溶液/空白溶液進樣前后的對比色譜圖，結果顯示色譜柱及系統殘留率僅為0.1%。
圖2.寡核苷酸溶液和空白溶液殘留對比圖譜
3
重復性
圖3結果表明本方法重現性和精密度良好。
圖3.50μg/ml樣品溶液重復性色譜圖
4
靈敏度
如圖4所示，通過推算，可以得知該方法的檢測限和定量限約為20ng/mL和50ng/mL。
圖4 0.5μg/mL樣品靈敏度溶液色譜圖
5
線性
如圖5所示，10-50 μg/mL范圍內O24的線性擬合結果，R2 ≥0.999。
圖5 10-50 μg/ml線性圖
實驗結論
綜上所述，
使用YMC-BioPro QA-F, 5μm, 100*4.6mm（P/N: QF00S05-1046WP）色譜柱開發的檢測寡核苷酸方法分離能力強，且該方法專屬性、精密度、工作曲線相關性等均非常優異，在常規液相設備上殘留極小，可以作為寡核苷酸類藥物的含量及雜質控制的優選解決方案。
關于熙華藥業
熙華藥業是上海熙華檢測技術服務有限公司的全資子公司，可提供符合中西方注冊申報要求的創新和仿制化學藥物的藥學CMC開發一體化服務，除此之外熙華藥業還有專門的中間體和符合cGMP的原料藥、臨床試驗用制劑生產車間。
作為專業的產品和技術服務提供商，上海漢堯一直專注于為中國的生物制藥/食品/化工實驗室行業用戶提供高品質的產品和技術服務，依托合作伙伴的支持，我們從單一產品銷售，逐步發展成為實驗室消耗品/儀器/設備的綜合服務商。已經合作的客戶中，包括了眾多國內頂級的制藥/CRO、CMO/藥檢/大學/研究所/精細化工領域用戶。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供，信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責，化工儀器網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示：為規避購買風險，建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。
14
