表面等離子共振(SPR)技術介紹
表面等離子共振(SPR, Surface Plasmon Resonance)是用于表征表面折射系數改變的光學專業技術,這里所說的表面一般是固相和液體間的界面。
表面等離子共振技術(SPR)在過去的10年有著長足的發展。SPR應用領域包括:薄膜、自組裝單分子層的形成及性質,蛋白質、核苷、醫藥品、表面活性劑等分子間的交互作用。SPR可以實時觀測到分子結合、薄膜形成等表面現象,并能給出高靈敏度、高選擇性同時zui小的非特異結合的信號。SPR可以免標記實時得到哪幾種生物分子互相作用,不同藥物或藥物修飾結構與生物分子間的相互作用,分子互相作用及分離的速度,分子互相作用何時達到平衡、互相作用力的大小等重要信息。
基底金層的存在可以引起入射光共振,共振只會在入射角小于臨界角時才會發生。臨界角與折射系數及金層上物質的質量相關,隨著金層表面物質質量的增加(如抗原與金層表面固定的特異性抗體結合),共振角度陰影會增加。
儀器特點
1) 兩個通道的SPR同時測量,參考通道減小了非特異性結合及體折射系數造成的偏差;
2) 高速掃描,得到高品質的動力學、熱力學數據;
3) 監控表面等離子共振和臨界角響應;
4) 響應vs.時間和反射率數據;
5) 靈敏度:0.35 µRIU rms(0.25RU);
6) 低數據漂移,< 0.1 μRIU/min;
7) 寬的折射系數范圍:1.32 - 1.6;
8) 10°C-90°C的溫度范圍:溫度改變可編輯,溫度改變時間快(以分鐘不是小時為單位),寬溫度范圍動力學能力(測定ΔH)
9) 分子質量分析探測限制低;
10) 藍寶石棱鏡:真正堅固不會損壞,高熱傳導性、熱穩定性好;
11) 系統以HPLC應用流體學為基礎:可在納米、微米或宏觀尺度下使用,可以使用不同內徑管徑(0.0025 to 0.04),可用細胞溶菌液為流動相,用戶易于維修;
12) 3700像素線性CCD陣列圖像傳感器;
13) 照明水平的反饋控制,單獨的光電二極管照明水平探測器及反饋線路穩定了激光LED;
14) 流動或靜態樣品池,微米小尺寸及大尺寸(大表面積)流動樣品池;
15) 傳感器薄片 聚乙烯、乙二醇背底的平坦羧基表面;
16) 試管或小玻璃管樣品選配;
17) 高品質光學元件確保反射率數據的精確,反射率vs.角度數據可以傳輸到計算機進行菲涅耳模型擬合得到膜厚及折射系數,可以向客戶提供源代碼,客戶可以對儀器進行用戶化修改
升級功能
* 可升級到雙通道表面等離子共振譜儀;
* 可升級增加自動進樣器功能;
* 可升級增加樣品收集的轉換閥;
* 可增配電化學或熒光功能;
應用領域 1) 廣泛應用于(不局限于)DNA低聚體、RNA、多肽、蛋白質相互作用;
2) 蛋白質/多肽與脂質/囊結合;
3) 動力學速度常數(on-forward-association, off-reverse-dissociation);
4) 濃縮監控;
5) 序列識別,抗原決定基篩選及掃描;
6) 方法發展;