在倉鼠ELISA試劑盒實驗中比較常用的一種分析方法。標準曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結果,甚至是關系到實驗的成敗。那么在倉鼠ELISA試劑盒實驗中,這一方面該如何處理呢?標準曲線法也稱為外標法或直接比較法,是一種簡便、快速的定量方法,
1.設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內,包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度*陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內。
2.倉鼠ELISA試劑盒采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度,這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現較大的偏離。
3.樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的,所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結果無從談起。
4.做出的標準曲線相關系數因實驗要求不同而有所變動,但一般來說,相關系數R至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999。
5.倉鼠ELISA試劑盒檢測標準樣品時,應按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。
6.標準曲線的樣品數一般為7個點,但至少要保證有5個點。
標準曲線濃度得到后,可通過計算器、Excell或SPSS統計軟件進行繪制,并得到相關的回歸方程(即計算公式)和相關系數(回歸系數)。
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