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一)采集與保存
采集:細胞培養上清液樣本通常在細胞培養一定時間后,通過收集細胞培養瓶或培養板中的上清液得到。
保存:細胞培養上清液樣本在采集后應盡快進行處理或置于 - 20℃或 - 80℃冰箱中保存。避免反復凍融,以免影響樣本質量。
(二)處理步驟
離心:收集到的細胞培養上清液應在離心前輕輕顛倒混勻,然后以適當的轉速離心一定時間,去除細胞碎片和雜質。
過濾:如果離心后的上清液中仍有雜質,可以通過過濾的方法進一步去除雜質。常用的過濾方法有微孔濾膜過濾和離心過濾等。
稀釋:根據實驗要求,將細胞培養上清液樣本用適當的稀釋液進行稀釋。稀釋倍數應根據待測物質的濃度和試劑盒的檢測范圍確定。
(三)注意事項
細胞培養條件的控制:為了確保細胞培養上清液樣本的質量,應嚴格控制細胞培養條件,如溫度、濕度、CO?濃度等。
避免污染:采集和處理細胞培養上清液樣本時應避免污染,使用無菌的容器和工具。
樣本質量控制:在進行實驗前,應對細胞培養上清液樣本進行質量控制,如檢測樣本的外觀、pH 值、蛋白濃度等。
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