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如何選擇合適的植物凝膠?
2023-8-4 閱讀(730)
植物凝膠是植物組織培養(yǎng)過程中用來凝固培養(yǎng)基的物質,其自身一般不具有營養(yǎng),作為固體支持物存在,一般在選用時考慮三個方面:1、使用方便;2、對培養(yǎng)植物不產生不利影響,不與培養(yǎng)基中其他組分例如抗生素發(fā)生反應;3、具有較好的透明度。
目前比較常用的植物凝膠主要包括:瓊脂(Agar)、結冷膠(Gellan Gum)、卡拉膠(Carrageenan)等。瓊脂是一種天然產物,主要來自紅藻科的兩個屬:石花菜屬(Gellidium)和江籬屬(Gracillaria)。石花菜屬本身小且生長緩慢,很難獲得,不經(jīng)濟,但其來源的瓊脂比江籬屬來源的具有更高的凝膠強度。由于瓊脂來自天然藻類,所以產品品質容易受到原材料由于生長環(huán)境變化導致的影響,最終產生批間差異。不過西美杰代理的Phytotech Labs做為具有20多年生產經(jīng)驗的植物組培產品供應商,在每批瓊脂出廠時,會進行清晰度、凝膠強度、植物生物生長以及產品其他理化性質的評估,以確保產品的穩(wěn)定性??ɡz同樣來源于藻類,但比瓊脂有更好的透明度。結冷膠是新型的凝膠,來源于微生物發(fā)酵產物,批間差更加穩(wěn)定,而且具有用量小,透明度更高的有點。
西美杰代理的專業(yè)植物培養(yǎng)基品牌Phytotech Labs,可以為廣大植物客戶提供以下不同型號的植物凝膠:
A111 | 瓊脂(江蘺來源) | ~1150g/cm2 | 6-10g/L | 通用型瓊脂,價格更優(yōu)惠 |
A296 | 瓊脂(石花菜來源) | ~900 g/cm2 | 6-10g/L | 普通植物研究,微生物研究;石花菜生長緩慢很難獲得,不經(jīng)濟,所以價格較A111高 |
A175 | 高純度瓊脂 | ~1100 g/cm2 | 6-10g/L | 用于胚胎發(fā)生等關鍵研究的高純度瓊脂;可替代A111,但比A111更純凈 |
A133 | 瓊脂結冷膠混合物 | TBD | 3.5-5 g/L | 用于工業(yè)化放大培養(yǎng) |
C257 | 卡拉膠 | TBD | 6-10g/L | 用于原生質體培養(yǎng) |
C2000 | 卡拉膠(高透明度) | >800 g/cm2 | 6-10g/L | 用于原生質體培養(yǎng) |
G434 | 結冷膠 | >800 g/cm2 | 2-4 g/L | 高透明度 |
G3251 | 結冷膠 | 400-700 g/cm2 | 2-4 g/L | G434升級款 |
使用注意事項:
l G434與氨基酸糖苷類抗生素(特別是卡那霉素和潮霉素B)一起使用對植物生長有影響。如遇此類情況,建議降低抗生素的使用濃度。
l 結冷膠的溶解要求比較特殊,一是溫度,結冷膠不溶于冷水,一定要是加入熱水攪拌溶解;二是培養(yǎng)基中二價陽離子濃度是結冷膠凝固的關鍵,一般是Mg2+,和Ca2+這2種離子的總濃度在4-10mM適中,而且2種離子的濃度最好都不要低于1.5mM,低于或者過高都會影響凝膠效果,一般來說MS培養(yǎng)基中二價離子濃度是足夠的,1/2MS培養(yǎng)基用結冷膠也可以凝固的很好,目前確定不適合用結冷膠的培養(yǎng)基有DKW,SH,LS。三是pH值,結冷膠凝固pH值為5.8,一般高溫滅菌影響不大,但不排除因為高壓條件變化導致pH值變化影響的凝膠效果。
l 植物凝膠尤其是瓊脂不凝固是與pH值有關系,pH過低導致的。出現(xiàn)此類情況是因為調節(jié)pH值的操作問題,很多客戶都先調節(jié)了pH值,然后再加入了植物凝膠,這個過程中pH值可能會降低到5.2,才會不凝固。解決辦法:加入瓊脂粉后調節(jié)pH值。
西美杰代理的PhytoTech LABs是美國的植物培養(yǎng)基供應商,公司從1997年成立不斷發(fā)展壯大,其優(yōu)質植物基礎培養(yǎng)基、植物凝膠、植物生長調節(jié)劑、抗生素享有盛名,成為全球植物科研工作者的主選品牌。PhytoTech LABs產品涵蓋廣泛、批次差異小、方便保存、性價比高、品質可靠,滿足多樣化的實驗需求,節(jié)省組培實驗所需大量人力和時間,提高植物組培環(huán)節(jié)的效率。PhytoTech LABs通過ISO 9001:2000質量體系認證,所有產品按照cGMP標準生產和包裝,生產過程受到嚴格質量控制,每個產品的物理學、化學、生物學特性都經(jīng)過了嚴格檢測,并經(jīng)過組織培養(yǎng)檢測。