德國cellendes的三維(3D)水凝膠系統是一套用于三維(3D)細胞培養時構建細胞外基質組分的試劑。使用者可以利用這些試劑控制細胞外環境,設計適合細胞生存的3D系統。
三維(3D)水凝膠系統與活體細胞外基質相似,采用該系統可使體外細胞培養更接近體內的生理特征,是基礎研究、藥物篩選和再生醫學等領域細胞功能研究的理想選擇。
如何選擇三維水凝膠試劑盒,請參看下文:
三維水凝膠系統主要有兩(三)部分組成:
1. maleinide-functionalized polymer(馬來酰亞胺基團---聚合物)
2. thiol-functionalized crosslinker(硫醇基團---交聯劑)
3. RGD peptide(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽)
(注:其中polymer 和crosslinker是必須的,RGD peptide需根據實驗選擇是否添加)
maleinide-functionalized polymer有兩種:
maleinide-PVA(馬來酰亞胺—聚乙烯)
maleinide-Dextran(馬來酰亞胺—葡聚糖)
thiol-functionalized crosslinker有兩種:
PEG-link(聚乙二醇交聯劑)
CD-link(聚乙二醇—MMP多肽交聯劑)
其中一種Polymer和一種crosslinker組合,培養細胞,就可讓細胞呈三維狀態。
1. Polymer的選擇決定了細胞是否能夠被人為的回收
2. crosslinker的選擇決定了細胞是否能夠降解局部水凝膠來為自己創造移動空間
3. RGD多肽可以為細胞提供可粘附的細胞外環境,這也是絕大多數細胞擴散和遷移的先決條件
指的是maleinide-PVA或maleinide-Dextra。其中 maleinide-PVA不能進行降解,而maleinide-Dextran可被葡聚糖酶,即可人為降解。
指的是粘附多肽 RGD peptide(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽),將細胞粘附到maleinide-PVA上,讓細胞在牢固的矩陣中。同時,RGD peptide還可以誘導細胞的極化。
細胞根據黏連受體,結合到polymer-peptide上
指的是PEG-link或CD-link。其中PEG-link穩定,不被降解,而CD-link是在PEG-link上加上MMP多肽,因此可被細胞自身分泌的基質金屬蛋白酶破壞MMP肽,從而能夠局部降解,為自己創造移動空間(如需觀測細胞的伸展、遷移,需選用CD-link,還需選用RGD肽)
各種組合的區別
1. 3D PVA-PEG水凝膠試劑盒(maleinide-PVA和PEG-link組合):
水凝膠不能降解,即細胞不能回收,細胞不能伸展和遷移
2. 3D Dextran -PEG 水凝膠試劑盒(maleinide-Dextran和PEG-link組合):
可人為降解(添加葡聚糖酶),即細胞可回收,細胞不能伸展和遷移
3. 3D PVA-CD水凝膠試劑盒(maleinide-PVA和CD-link組合):
水凝膠不能降解,細胞自身分泌基質金屬蛋白酶,可為自己創造移動空間,細胞不能伸展和遷移。如想觀測細胞的遷移和伸展,需在凝膠中添加RGD肽。
4. 3D Dextran–CD水凝膠試劑盒(maleinide-Dextran和CD-link組合):
可人為降解(添加葡聚糖酶),細胞自身分泌基質金屬蛋白酶,可為自己創造移動空間,細胞不能伸展和遷移。如想觀測細胞的遷移和伸展,需在凝膠中添加RGD肽。
3D PVA-PEG 水凝膠試劑盒 | 3D PVA-CD 水凝膠試劑盒 | 3D Dextran -PEG 水凝膠試劑盒 | 3D Dextran–CD 水凝膠試劑盒 | |
Mal-PVA | 170ul | 170ul | / | / |
Mal-Dextran | / | / | 170ul | 170ul |
PEG-link | 200ul | / | 200ul | / |
CD-link | / | 200ul | / | 200ul |
Dextranase | / | / | 500ul | 500ul |
10×CBpH5.5 | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul |
10×CBpH7.2 | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul |
Thioglycerol | 60ul | 60ul | 60ul | 60ul |
water | 900ul | 900ul | 900ul | 900ul |
各試劑盒中所含試劑成分
注:如果想觀察細胞的伸展和遷移,還要加入RGD peptide(單獨購買);
通過調整polymer、crosslinker和RGD 肽,可控制水凝膠的彈性、硬度,決定細胞的張力。
三維水凝膠產品介紹鏈接:http://www.qbioscience。。com/productshow_537.html
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