抗體的概念和分類
作者:陳青(北京維德維康生物技術有限公司)
所有免疫學測定的方法中,均要求有抗體參與,沒有抗體參與的生物學測定方法就不能叫免疫測定法。在elisa中,抗體的優劣直接影響測定的質量(如特異性、靈敏度、精密度和準確性等)和操作簡便性。因此,了解抗體的基本特性,制備抗體是建立和發展elisa理想方法的基本條件。
1.抗體概念:
抗體:動物機體某些活性細胞在某些物質(抗原)刺激下產生的,并能與這些物質特異性結合的一類活性物質。
由于哺乳動物體內產生的抗體主要分布于體液,尤其是血清中,因此人們常常將抗血清作為抗體的同義詞,將抗原抗體反應稱為血清學反應。實際上抗血清表示從免疫動物體液或免疫細胞培養液中分離得到的原血清或培養液上清液,抗體則表示抗血清中能與抗原特異性結合的物質。
- 抗體分類:
抗體的種類繁多,分類也無一定標準。在免疫學專著中,常根據其產生機制、抗原來源、抗原刺激的方式以及與抗原反應的性質等特征進行如下分類:
在elisa中,為了制備抗體,必須進行人工免疫,并要求用作免疫的抗原(免疫原)來源與免疫動物在分類學上不屬于同一種,這樣制備的抗體稱為異種抗體。但在自然界中常常發現同種動物不同的個體之間,其組織成分的結構也有差異,用這些組織成分刺激同種屬的另一個體,也能產生抗體,即同種抗體。某些抗體除與相應抗原發生結合反應外,還可與無血緣關系的抗原反應。如以豚鼠組織免疫家兔,制得的抗體在補體參與下能溶解綿羊紅細胞,這一類抗體稱為異嗜抗體。此外還有一類抗體稱為自身抗體,是由于機體在某種條件下對自身組織(抗原物質)產生的抗體。這類抗體在elisa中不僅不可能應用,而且有干擾作用。根據抗原刺激的方式認為,凡經人工免疫、預防接種、感染或自然接觸某些抗原物質所產生的抗體,都稱為免疫抗體。反之,沒有明顯的抗原刺激即天然存在于體液中的抗體稱為天然抗體。如血型系統中的抗A抗體和抗B抗體等,天然抗體不能用于elisa,相反對elisa測定的質量有影響。
所謂*抗體就是通常所指的由抗原刺激機體產生的抗體,其免疫球蛋白的單體有兩個以上的抗原結合點,因此又稱二價抗體或多價抗體。這類抗體與抗原結合后可在特定條件下出現可見反應。如在普通生理鹽水中*抗體可與可溶性抗原(如蛋白質膠體)或顆粒性抗原(如微生物顆粒)反應,出現可見的沉淀或凝集現象。
不*抗體又稱為單價抗體或封閉抗體,由于免疫球蛋白單體中兩個抗原結合位點之一失去免疫活性,即只有一個位點可與抗原結合。這類抗體與抗原結合后,在生理鹽水中不能形成大的抗原抗體復合物,故不出現可見反應,但能封閉和遮掩抗原決定簇,阻遏抗原再與相應的抗體結合。
抗原刺激動物機體后,由多個免疫細胞系(克隆)產生的抗體,可與同一抗原的多個決定簇結合,這類抗體稱為多克隆抗體。通常由免疫動物制備的抗血清屬于這一類。在特定條件下,通過克隆選擇(即除掉多余的免疫細胞系),由一個細胞系產生只能識別抗原某一類決定簇的抗體,稱為單克隆抗體。
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