紫外可見分光光度計簡介1852年,比爾(Beer)參考了布給爾(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所發表的文章,提出了分光光度的基本定律,即液層厚度相等時,顏色的強度與呈色溶液的濃度成比例,從而奠定了分光光度法的理論基礎,這就是的比爾朗伯定律。1854年,杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將此理論應用于定量分析化學領域,并且設計了*臺比色計。到1918年,美國國家標準局制成了*臺紫外可見分光光度計。此后,紫外可見分光光度計經不斷改進,又出現自動記錄、自動打印、數字顯示、微機控制等各種類型的儀器,使光度法的靈敏度和準確度也不斷提高,其應用范圍也不斷擴大。
]從儀器理論上講,各種紫外可見分光光度計,都是根據比耳定律設計的;而比耳定律研究的是在平行光、單色光的條件下,物質對光的吸收。但是,紫外可見分光光度計的單色器不可能得到真正的單色光。并且,單色器系統不同,它產生的單色光的純度(光譜帶寬)也不同,并且光通過物質時,也不可能是真正的平行光。因此,嚴格地說,實際工作中,任何紫外可見分光光度計,都不可能真正滿足比耳定律。所以,紫外可見分光光度計都是針對近似平行光、近似單色光的條件設計的。所以,就看誰設計、制造儀器zui能滿足或接近比耳定律(或產生的比耳定律的偏離zui小),誰的儀器到了使用者手里,由于非平行光或非單色光產生的分析誤差zui小,誰的儀器就(當然還有雜散光、噪聲、穩定性等要求)。這就是從儀器學理論,去看紫外可見分光光度計的設計、制造誤差的zui根本、zui本質的問題;也是使用者從儀器學理論去看紫外可見分光光度計的分析誤差的zui根本、zui本質的問題
紫外可見分光光度計主要應用
1檢定物質
根據吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是zui大吸收波長雖ax和摩爾吸收系數是檢定物質的常用物理參數。這在藥物分析上就有著很廣泛的應用。在國內外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的zui大吸收波長和吸收系數載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。
2與標準物及標準圖譜對照
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質,則兩者的光譜圖應*一致。如果沒有標樣,也可以和現成的標準譜圖對照進行比較。這種方法要求儀器準確,精密度高,且測定條件要相同。
3比較zui大吸收波長吸收系數的一致性
4純度檢驗
5推測化合物的分子結構
6氫鍵強度的測定
實驗證明,不同的極性溶劑產生氫鍵的強度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度,以確定選擇哪一種溶劑。
7絡合物組成及穩定常數的測定
8反應動力學研究
9在有機分析中的應用
有機分析是一門研究有機化合物的分離、鑒別及組成結構測定的科學,它是在有機化學和分析化學的基礎上發展起來的綜合性學科。
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