(一)elisa實(shí)驗(yàn)原理及類型
將已知抗體或抗原結(jié)合在某種固相載體上,并保持其免疫活性。測定時(shí)將待檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體或酶標(biāo)抗原按不同步驟與固相載體表面吸附的抗體或抗原發(fā)生反應(yīng),用洗滌的方法分離抗原抗體復(fù)合物和游離物成分,然后加入底物顯色,進(jìn)行定性或定量測定。
ELISA可用于檢測抗體,也可用于檢測抗原。根據(jù)檢測目的和操作步驟的不同,通常有三種類型的檢測方法。
1.間接法 此法是檢測抗體zui常用的方法。將已知抗原吸附于固相載體上,加入待測血清(抗體)與之結(jié)合,洗滌后,加酶標(biāo)抗體和底物進(jìn)行測定。其原理見圖12-1。
圖12—1 ELISA間接法示意圖
2.雙抗體夾心法 此法常用于檢測抗原。將已知抗體吸附于固相載體,加入待測標(biāo)本(含相應(yīng)抗原)與之結(jié)合,溫育后洗滌,加入酶標(biāo)抗體及底物溶液進(jìn)行測定。見圖12-2。
圖12—2 雙抗體夾心法檢測抗原
3.競爭法 此法可用于抗原及半抗原的定量測定,也可用于測定抗體。以測定抗原為例,將特異性抗體吸附于固相載體上,加入待測抗原和一定量的已知酶標(biāo)抗原,使二者競爭地與固相抗體結(jié)合,經(jīng)過洗滌分離,zui后結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原與待測抗原含量呈負(fù)相關(guān)。見圖12-3。
免疫酶測定法(ELISA)
圖12-3競爭法測抗原示意圖
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。