1。處理切片

從數據庫查詢IHC arrangement 中查找當天的工作安排，找出相應的slide NO，于切片盒中取出放進架子中。

（1）  在二甲苯Ⅰ中30mins，在二甲苯Ⅱ中20mins; 二甲苯3中10mins;

（2）  在無水乙醇中浸泡5mins;

（3）  95%乙醇中浸泡5mins;

（4）  80%乙醇中浸泡5mins;

（5）  60%乙醇中浸泡5mins;

（6）  單蒸水中浸泡5mins。

2.抗原修復

取一定量的CB緩沖液于一耐高溫容器里，放進微波爐中，power10，2mins，使之沸騰。然后把切片小心放入其中，再緩緩放入微波爐中加熱，power3，5mins。完畢，放在室溫自然冷卻，30-40mins后，降至室溫。

3.免疫組織化學染色

（1）  取出切片，TBS沖洗4-5次;甩干，擦凈。加入30ul H2O2，于室溫濕盒中封閉30mins;

（2）  甩干，擦凈。滴加稀釋好的一抗40 ul，4℃過夜;

（3）  TBST沖洗4-5次，滴加生物素化二抗20 ul，室溫孵育1-2hrs;

（4）  TBS沖洗4-5次;滴加酶標親和素20ul，室溫孵育30mins;

（5）  TBS沖洗4-5次;滴加30ul substrate 著色后迅速沖洗干凈;

（6）  滴加1滴hematoxylin，5-10mins;

（7）  鏡檢;

（8）  脫水，封片。

原文地址：http://www.fantibody.com/article/article.html?doc=161