實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞功能表征——IsoPlexis 單細(xì)胞功能蛋白組技術(shù)介紹
Isoplexis是一種高通量單細(xì)胞蛋白質(zhì)組學(xué)檢測(cè)技術(shù), 可通過對(duì)每個(gè)免疫細(xì)胞進(jìn)行功能性免疫譜分析,在單個(gè)細(xì)胞水平上測(cè)量蛋白質(zhì)分子,實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞功能表征。
傳統(tǒng)的蛋白檢測(cè)需要搭配多種儀器完成檢測(cè),繁瑣的實(shí)驗(yàn)流程和人為因素會(huì)影響數(shù)據(jù)的可靠性。同時(shí)傳統(tǒng)蛋白檢測(cè)無法檢測(cè)活細(xì)胞。Isoplexis技術(shù)克服了傳統(tǒng)蛋白檢測(cè)的問題,以微流控技術(shù)結(jié)合蛋白質(zhì)組條形碼技術(shù),輔以自動(dòng)化系統(tǒng),成功達(dá)成自動(dòng)化高靈敏度多因子檢測(cè),減少人為因素的干擾。
Isoplexis采用微流控技術(shù),通過12,000個(gè)獨(dú)立的亞納升級(jí)別的微室同時(shí)捕獲上千個(gè)單細(xì)胞。搭配IsoCode芯片抗體條形碼技術(shù),捕獲每個(gè)小室中單個(gè)活細(xì)胞分泌的多重蛋白質(zhì),或者對(duì)單細(xì)胞裂解后釋放出的多種磷酸化蛋白進(jìn)行捕獲,然后通過基于ELISA原理的全自動(dòng)化蛋白檢測(cè)技術(shù),捕獲多重蛋白的熒光信號(hào),一次可采集多達(dá)30種以上的功能蛋白質(zhì)。在檢測(cè)中從每個(gè)單細(xì)胞獲得的蛋白質(zhì)組信號(hào)將無縫傳輸?shù)絀soSpeak生信分析軟件,進(jìn)行全自動(dòng)分析和可視化呈現(xiàn),并可直接用于文章發(fā)表。
Isoplexis可以被應(yīng)用于多種領(lǐng)域,例如腫瘤及腫瘤免疫、感染性疾病、自身免疫性疾病、抑制免疫等等。它能夠幫助科學(xué)家研究活躍的免疫細(xì)胞。通過單個(gè)細(xì)胞的研究,我們可以評(píng)估它們是如何應(yīng)對(duì)環(huán)境刺激的,從而了解細(xì)胞間的相互作用,以及基于這些相互作用的潛在疾病治療方法。通過細(xì)胞多功能指數(shù)分析,可以評(píng)估細(xì)胞的綜合免疫功能,進(jìn)行量化和比較,如檢測(cè)T細(xì)胞的多功能性,包括其免疫效應(yīng)作用、免疫刺激作用、趨化作用、免疫調(diào)節(jié)和炎癥相關(guān)功能等。
在研究的不同階段,Isoplexis可被應(yīng)用于:
基礎(chǔ)研究:探索疾病發(fā)病機(jī)制
臨床前研究:篩選有潛力的候選療法,實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)治療
臨床試驗(yàn):評(píng)估治療后療效,發(fā)現(xiàn)生物標(biāo)志物
Isoplexis的另一優(yōu)勢(shì)是強(qiáng)大的生信分析軟件:Isospeak。它可以揭示真正的蛋白質(zhì)組學(xué),對(duì)樣本分層,揭示功能性差異,以及計(jì)算差異顯著性。同時(shí)也支持包括散點(diǎn)圖,熱圖,餅圖,t-SNE圖,PAT- PCA主成分分析圖,細(xì)胞多功能指數(shù)(PSI)柱狀圖在內(nèi)的多種展示方式。
技術(shù)優(yōu)勢(shì)
高靈敏度、高通量:?jiǎn)渭?xì)胞水平,活細(xì)胞分泌細(xì)胞因子及胞內(nèi)功能蛋白檢測(cè)
全自動(dòng)平臺(tái):全自動(dòng)單細(xì)胞捕獲、孵育、多重蛋白檢測(cè)及分析于一體,減少人為干擾
強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析平臺(tái):IsoSpeak軟件強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析能力,結(jié)果圖表可直接用于發(fā)表
免疫細(xì)胞綜合功能評(píng)價(jià):細(xì)胞多功能指數(shù)PSI,免疫細(xì)胞綜合功能評(píng)價(jià),更好地反映體內(nèi)生理相關(guān)性預(yù)測(cè)療效的生物標(biāo)志物
節(jié)約成本:加速研究及治療開發(fā)周期幫助篩選最有前途的產(chǎn)品,節(jié)約成本
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