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磺酰羅丹明 B(SRB)在細胞增殖中的應用

來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2024年11月25日 17:22  

SRB 介紹

磺酰羅丹明 B(Sulforhodamine B,SRB)是一種粉紅色的陰離子染料,在細胞生物學研究中被廣泛用于細胞增殖和細胞毒性的檢測。SRB 可以與細胞內的蛋白質結合,形成穩定的復合物,其顏色強度與細胞內的蛋白質含量成正比。

 

技術原理

蛋白質結合:SRB 能夠與細胞內的堿性氨基酸殘基結合,特別是與精氨酸、賴氨酸和組氨酸等殘基結合。這種結合是相對穩定的,并且在酸性條件下不易解離。

顏色強度與蛋白質含量的關系:SRB 與細胞內蛋白質結合后,形成的復合物在特定波長下具有較高的吸光度。吸光度的大小與細胞內的蛋白質含量成正比,因此可以通過測量吸光度來間接反映細胞的數量或生物量。

 

運輸和保存方法

冰袋運輸。4℃保存,2年有效。

 

使用方法

  1. 取出細胞,棄去培養液;

  2. 小心加入固定液,每孔100 µL,4℃孵育1 h,棄去固定液;

  3. 加入清洗液1,每孔100 µL,室溫下靜置30 s,棄去清洗液1,重復該步驟;

  4. 加入染色液,每孔50 µL,室溫下避光孵育15 min,棄去染色液;

  5. 加入清洗液2,每孔100 µL,棄去清洗液2(該步驟需快速完成,以免染色漏出胞外),重復該步驟5-10次,直至把多染料洗盡為止;

  6. 加入溶解液,每孔100 µL,室溫下避光孵育5 min;

  7. 515 nm波長檢測其吸光值。

 

相關問題

Q:SRB染色是否會影響細胞的活性?

A:SRB染色本身通常不會對細胞的活性產生明顯影響。但是,在固定和染色過程中,要注意使用適當的條件,避免對細胞造成過度損傷。

Q:SRB染色與MTT法、CCK-8法等如何選擇?

A:MTS、CCK8及SRB法等都是用來檢測細胞代謝活性的方法,可根據實驗要求和預算進行選擇。

Q:如何處理 SRB 染色后的廢液?

A:SRB 染色后的廢液含有酸性和有毒物質,應按照實驗室的規定進行妥善處理。一般來說,可以將廢液收集在特定的容器中,經過中和和處理后再排放。

 

相關產品

產品名稱

產品貨號

規格

SRB Cell Proliferation and cytotoxicity assay kit
磺酰羅丹明BSRB)細胞增殖和毒性檢測試劑盒

40205ES76

500T

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40203ES60/76/80/88/92

100T/500T/1000T/3×1000T/10×1000T

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40210ES10/60/80

10mL/100mL/10×100mL

LDH Cytotoxicity Assay Kit
乳酸脫氫酶(LDH)細胞毒性檢測試劑盒

40209ES76

500T

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40206ES76/80

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40202ES76/80/92

500T(5ml)/1000T(10ml)/10000T(100ml)

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40714ES76/80

500T/1000T

CFDA, SE 細胞增殖示蹤熒光探針

40715ES25

25mg

Calcein, AM, Ultrapure Grade 鈣黃綠素,超純級

40719ES50/60

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CellTracker Green CMFDA (5-Chloromethylfluorescein Diacetate) 活細胞示蹤劑CMFDA(綠色)

40721ES50/60/72

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