MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(500次)
產品貨號:20311
產品規格:500次
產品簡介:
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的檢測。MTT可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產物Formazan。在特定溶劑存在的情況下,可以被溶解。然后通過酶標儀可以測定570nm波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快,則吸光度越高;細胞毒性越大,則吸光度越低。
本試劑盒采用了的Formazan溶解液配方,無需去除原有的培養液,可以直接加入Formazan溶解液溶解Formazan。從而避免了由于去除培養液時Formazan被部分去除而引起的誤差。
本試劑盒本底低,靈敏度高,線性范圍寬,使用方便。
本試劑盒可以測定500個樣品。
包裝清單:
產品名稱 | 包裝 | 儲存條件 |
MTT溶液 | 10ml | 4℃/長期保存-20℃、避光 |
Formazan溶解液 | 55ml | 4℃、避光 |
操作步驟:
1. 通常細胞增殖實驗每孔加入100μl 2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100μl 5000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。按照實驗需要,進行培養并給予0-10μl特定的藥物刺激。
2. 每孔加入20μl MTT溶液,在細胞培養箱內繼續孵育4小時。
3. 每孔加入100μl Formanzan溶解液,在細胞培養箱內再繼續孵育。直至在普通光學顯微鏡下觀察發現Formazan全部溶解。通常37℃孵育4小時左右,紫色結晶會全部溶解。如果紫色結晶較小較少,溶解的時間會短一些。如果紫色結晶較大較多,溶解的時間會長一些,建議室溫或37℃過夜孵育。
4. 在570nm測定吸光度。如無570nm濾光片,可以使用560-600nm的濾光片。
注意事項 :
1. 由于使用96孔板進行檢測,如果細胞培養時間較長,一定要注意蒸發的問題。一方面,由于96孔板周圍一圈最容易蒸發,可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS、水或培養液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養箱內水源的地方,以緩解蒸發。
2. MTT溶液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
3. Formazan溶解液結凍或產生沉淀時可以37℃水浴孵育以促進溶解,并且必須在全部溶解并混勻后使用。混勻過程請用移液槍輕輕吹勻,勿上下顛倒,避免氣泡。
4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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