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GPC凝膠凈化系統的使用注意細節

來源:上海杜凱生物科技有限公司   2024年11月07日 08:54  
  GPC凝膠凈化系統是一種高效的分離純化工具,廣泛應用于科學研究和工業領域。為了確保其性能穩定、數據準確,操作人員必須遵循一系列嚴格的操作規范和維護流程。將詳細介紹GPC凝膠凈化系統的使用方法和日常維護注意事項。
  一、流動相的準備與使用
  1. 流動相純度要求:建議使用色譜純及以上級別的流動相(如乙酸乙酯:環己烷=1:1或二氯甲烷)。流動相的純度直接影響到分析結果的準確性和重現性。
  2. 配置流動相:根據凝膠凈化色譜柱上的標簽規格要求配置相應的流動相。對于特定標簽的凝膠色譜柱,應嚴格按照規定的流動相比例進行配置,避免使用不合適的流動相對色譜柱造成損害。
  3. 過濾與脫氣:流動相應使用0.45微米的濾膜過濾,并超聲脫氣混合均勻。這一步驟能夠有效去除流動相中的雜質和氣泡,保證系統的正常運行。
  4. 適量配制:由于方法中的流速為5mL/min,如果實驗樣品數量較多,應一次性配好充足的流動相,避免在實驗過程中添加。中途添加流動相易產生氣泡,導致基線不穩定。
  二、樣品處理
  1. 樣品溶劑選擇:在選擇樣品溶劑時,應盡量選擇與流動相極性相符的溶劑,推薦使用流動相作為樣品溶劑。這有助于減少樣品對凝膠色譜柱的影響,提高分離效果。
  2. 樣品過濾:樣品在進樣前必須經過0.45微米微孔膜過濾,以防止顆粒物進入系統,堵塞色譜柱或損壞儀器。
  三、系統操作
  1. 開機準備:將儀器及電腦各部分電源打開,待檢測器自檢通過后(約2分鐘),再打開工作站軟件。確保所有連接正常,通訊成功。
  2. 清洗與平衡:點擊工作站主界面左邊的【手動控制】,選擇【GPC信息】窗口,點擊【餾分】,輸入注射泵體積“8” mL,點擊【清洗】。完成后,設置輸液泵流量為5 mL/min,點擊【運行】。色譜柱平衡時間一般為30分鐘,若長期未使用則需要適當延長平衡時間。
  3. 方法查看與批表編輯:在【方法管理】中查看方法參數,新建批表并選擇運行方法。確保所有設置正確無誤后,再進行樣品分析。
  四、日常維護
  1. 輸液泵壓力監控:如發現控制面板上的輸液泵壓力變大或報警停泵,需將儀器的放空濾片座卸下來用流動相超聲清洗10~20分鐘后再安裝使用。
  2. 長時間不用時的保養:若長時間不使用GPC凝膠系統,請先用對應的流動相將凝膠色譜柱沖洗10~20分鐘,然后取下并用聚四氟堵頭將其兩端封好。下次使用時再重新安裝,并用流動相沖洗十分鐘以上,使其基線達到平穩后再使用。
  3. 管路清洗:若使用GPC儀器做茶葉等顏色較深的樣品,當回收率降低時,每隔半個月將凝膠凈化色譜柱拆下來,用不銹鋼兩通替代柱子連接管路,把流動相換成甲醇:丙酮(1:1),沖洗管路一個小時,然后換回流動相沖洗二十分鐘,再把凝膠柱安裝上繼續使用。
  4. 保護柱(預柱)清洗:當回收率降低時,如有保護柱(預柱),用甲醇:丙酮(1:1),低流速反向沖洗二十分鐘。
  5. 廢液處理:及時處理廢液瓶,避免廢液過滿而流出造成的污染。
  6. 自動液體處理器維護:在使用過程中不要隨便移動或變更樣品盤上的樣品架,以防進樣針折斷等事故發生。實驗結束后,盡可能做一些防塵措施,以延長其使用壽命。
  五、實驗結束后的操作
  實驗結束后,請點擊工作站左側下方的【手動操作】按鈕,選擇【GPC信息】項,點擊【輸液泵】中的【停止】按鈕,關閉輸液泵后,再關閉工作站,最后分別將儀器及電腦的電源關閉。

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