TGIRT-III RTnase 具有依賴于 DNA/RNA 雜交鏈的反轉錄酶活性,能快速合成 cDNA,該酶 具有強的鏈轉換活性(Switch)。因此該酶可用于 tRNA、ncRNA、miRNA 等核酸分子的同步逆轉錄和加接頭(TGIRT template-switching reaction,用于 TGIRT-Seq)。TGIRT-III RTnase 具有強的延伸性能,因此更易獲得全長的 cDNA。此外,該酶的強 switch 活性,使得可以利用 RNA 的 5’端帽結構進行 SMART 建庫(SAMRT-Seq)。反應溫度為 37-60°C,最佳反應溫度為 50°C。 本公司 TGIRT-III Reverse Transcriptase 是重組表達,并經多步純化制備的重組蛋白。
鏈特異性轉錄組分析全細胞或無細胞轉錄組測序非編碼 RNA 轉錄組測序RIP-seq, HITS-CLIP, irCLIP and CRAC通過高通量測序鑒定 RNA 堿基修飾RNA 結構映射長 cDNA 的合成全基因組或靶向 RNA 結構分析
活性定義
1 活 性 單 位 指 在 50℃ 下 , 1×TGIRT-III Reverse Transcriptase 反 應 緩 沖 體 系 下 , 利 用 poly(rA)/oligo(dT)42作為底物,10 min 內將 10nmole dNTP 摻入酸不溶性物質所需的酶量。
特點
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比逆轉錄病毒逆轉錄酶更高的熱穩定性,持續性和保真度,能夠以高度結構化或修飾的
RNA 為模板,合成全長的端到端 cDNA。
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新的端對端模板轉換活性,其能夠在逆轉錄過程中連接 RNA-seq 或 PCR 接頭,并且不再
需要單獨的 RNA 3'-接頭連接步驟。
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不需要 RNA 連接酶,對模板量要求低,簡化 RNA-seq 文庫構建步驟,且更高效。
適用范圍
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確定 RNA 高級結構
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長 cDNA 的合成
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全基因組或靶向 RNA 結構分析
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鏈特異性轉錄組分析
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全細胞或無細胞轉錄組測序
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非編碼 RNA 轉錄組測序
? RIP-seq,HITS-CLIP,irCLIP and CRAC
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通過高通量測序鑒定 RNA 堿基修飾
品名 | 貨號 | 規格 | 品牌 |
TGIRT-III逆轉錄酶 | 78DC10040-1nmol | 1nmol | biohub |
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