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正置生物顯微鏡的成像原理主要基于光學放大原理。當光線通過物鏡時，它會被聚焦在樣本上，然后樣本反射或透射的光線再通過目鏡被進一步放大，最終呈現給觀察者。在熒光顯微鏡中，還會使用特定的熒光物質和濾色鏡來增強特定波長的光線，從而更清晰地觀察樣本中的熒光標記物。
正置生物顯微鏡的操作注意事項：
在使用正置生物顯微鏡時，需要注意以下幾點以確保獲得最佳的觀察效果：
持鏡時必須是右手握臂、左手托座的姿勢，不可單手提取，以免零件脫落或碰撞到其它地方。
輕拿輕放，不可把顯微鏡放置在實驗臺的邊緣，應放在距邊緣一定距離處，以免碰翻落地。
保持顯微鏡的清潔，光學和照明部分只能用擦鏡紙擦拭，切忌口吹手抹或用布擦；機械部分可用布擦拭。
水滴、酒精或其它藥品切勿接觸鏡頭和鏡臺，如果沾污應立即用擦鏡紙擦凈。
放置玻片標本時要對準通光孔中央，且不能反放玻片，防止壓壞玻片或碰壞物鏡。
養成兩眼同時睜開觀察的習慣，以左眼觀察視野，右眼用以繪圖。
不要隨意取下目鏡，以防止塵土落入物鏡；也不要任意拆卸各種零件，以防損壞。
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