直播答疑 | 細胞培養(yǎng)實驗室的環(huán)境要求和監(jiān)測方法
普諾賽直播課
在8月20日普諾賽直播間中,左明祥老師為大家?guī)砹?strong style="-webkit-tap-highlight-color: transparent; margin: 0px; padding: 0px; outline: 0px; max-width: 100%; box-sizing: border-box !important; overflow-wrap: break-word !important; visibility: visible;">《細胞培養(yǎng)實驗室的環(huán)境要求和監(jiān)測方法》的專題課程。
直播回放路徑
①可在“武漢普諾賽”微信視頻號查看;
②B站搜索“普諾賽生物”,點擊最新視頻觀看學(xué)習(xí)。
每一份好奇心都是推動科學(xué)進步的力量,針對大家在直播中提出的問題,我們特意邀請左老師為大家進行深入解答。
另外,我們誠摯地歡迎大家在評論區(qū)暢所欲言。無論是實驗技術(shù)問題還是感興趣的課程主題,我們都將傾聽您的每一個意見并積極回應(yīng),也會根據(jù)大家的需求定制專題講座。感謝您的參與和關(guān)注!
直播問題解答
問
過濾器和水盤如何清潔?
在正常情況(未出現(xiàn)污染)下,培養(yǎng)箱的水盤應(yīng)使用75%酒精擦拭消毒,然后加入無菌水并添加適量的抑菌劑。當培養(yǎng)箱出現(xiàn)污染時,可以使用新潔爾滅消毒液或3%的過氧化氫消毒液對水盤進行消毒,消毒時間為30 min。此外,也可以使用紫外燈進行消毒處理,消毒完成后用無菌水擦拭干凈,添加無菌水和抑菌劑后正常使用。
培養(yǎng)箱內(nèi)的HEPA過濾器一般不需要單獨清潔,當使用出現(xiàn)異常時可以進行更換(需要專業(yè)維修人員更換)。對于超凈工作臺和生物安全柜中的過濾器,只需根據(jù)實際使用情況,定期(半年至一年)更換初效濾網(wǎng)即可。
問
消毒時間多久合適?
使用消毒液消毒,時間30 min左右即可;若使用的消毒液存在腐蝕性,應(yīng)在消毒完成后使用無菌水將消毒液擦拭干凈。使用臭氧或紫外燈的消毒時間一般也是30 min。
問
怎樣檢測二氧化碳泄漏?
如果需要檢測泄漏至空氣中的CO2濃度,防止其濃度過高可能引發(fā)的窒息風(fēng)險,可以使用專門的CO2濃度檢測儀,或者使用氧氣濃度監(jiān)測儀(適用于多種氣體環(huán)境,如含CO2或氮氣的)。
如果是要檢測管道泄漏的位置,初步的檢查方法可以是使用肥皂水在管道的接頭位置進行涂抹,觀察是否出現(xiàn)氣泡;如需要準確檢測,則需專業(yè)人員使用專業(yè)檢測工具進行檢測。
問
細胞培養(yǎng)間的實驗服怎么消毒和存放比較合適?
實驗服在清洗完成之后,可以放在專用的滅菌袋中,再放進高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌處理。滅菌完成后,將實驗服連同滅菌袋一起放入烘箱中烘干備用。
問
臭氧消毒適用于什么實驗室?
臭氧消毒適用于配套有新風(fēng)系統(tǒng)的實驗室。臭氧一般需要通過新風(fēng)系統(tǒng)進入實驗室空間,并在空間內(nèi)達到一定濃度才能起到較好的消毒效果。消毒完成之后,也需要通過新風(fēng)系統(tǒng)將殘留的臭氧排出實驗室,否則會對實驗室環(huán)境產(chǎn)生影響。
問
支原體檢測沒有污染,但細胞狀態(tài)不好,考慮什么污染呢?
細胞狀態(tài)不好的因素有很多,首要且關(guān)鍵的一步是排除污染因素。如果通過各種檢測手段(細菌、真菌通過瓊脂板或空培檢測,支原體使用試劑盒檢測)都無法檢測到污染,則可能不是因污染導(dǎo)致的。
如果仍懷疑存在污染,可以嘗試向培養(yǎng)物中添加適當濃度的廣譜抗生素。如果添加抗生素后細胞狀態(tài)明顯好轉(zhuǎn),說明確實存在某種難以檢測的微生物影響細胞狀態(tài);如果添加抗生素后細胞狀態(tài)未出現(xiàn)好轉(zhuǎn)甚至更差,則需從其他方面排查細胞狀態(tài)不好的原因,如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)條件、細胞特性或外部操作因素等。
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