高通量皮升級液滴單細胞分選系統是基于液滴微流控技術開發而成的超高通量單細胞分選平臺。它每秒可以發生成千上萬的微液滴(pL),細胞包裹于微液滴之中,可進行生長、裂解、代謝、反應等生物生化過程,并與液滴之中的熒光篩子進行充分結合,產生不同強度的熒光信號;之后利用微液滴分選技術將低產出和高產出的細胞通過熒光信號分選出來,實現分選過程的高通量化。
應用案例:
案例一:合成D-阿洛酮糖3-差向異構酶定向進化
構建了基于液滴微流控(DREM cell)的超高通量篩選平臺,并與D-阿洛酮糖生物傳感器相結合,用于酮糖3-差向異構酶(KEases)的定向進化;獲得突變體M3-2的催化效率比原始sfDAE提高17倍。
案例二:高產谷氨酰胺突變株高通量篩選
利用高通量皮升級液滴微流控細胞分選儀(DREM cell),對常壓室溫等離子體(ARTP)誘變的解淀粉芽孢桿菌全基因組突變庫進行超高通量篩選,成功獲得了一株谷氨酰胺酶產量提高47%以上的突變株。
案例三:谷氨棒桿菌高效分泌蛋白關聯基因挖掘
在谷棒中繪制了蛋白分泌的基因型-表型關聯圖譜,系統地揭示了其基因組中能夠用于改善分泌蛋白生產的基因位點,通過氧還轉錄因子CosR和RshA的組合敲除獲得VHH產量提高2.78倍的底盤菌株。
案例四:單細胞培養的蜜蜂腸道微生物功能多樣性研究
該研究利用高通量液滴微流控平臺(DREM cell),對蜜蜂腸道單個細菌進行皮升級液滴培養和niao槍法宏基因組測序,通過宏基因組分析展示了蜜蜂腸道微生物的菌株水平多樣性,揭示了不同細菌屬中潛在新菌株的存在。
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