液相色譜(HPLC)是一種常用的分離和分析技術,其中基線的穩定性對于數據分析至關重要。基線波動可能導致數據分析錯誤,影響實驗結果的準確性。以下是液相色譜檢測器基線波動的一些常見原因及其解決方法。
1. 柱溫波動
原因:即使是很小的溫度變化都可能引起基線的波動,影響示差檢測器、電導檢測器、較低靈敏度的紫外檢測器或其他光電類檢測器。
解決方法:控制好柱子和流動相的溫度,在檢測器之前使用熱交換器。如果柱溫過高,可以考慮減少柱溫。
2. 流動相不均勻
原因:流動相條件變化引起的基線漂移可能大于溫度導致的漂移。
解決方法:使用HPLC級的溶劑,高純度的鹽和添加劑。流動相在使用前進行脫氣,使用中使用氦氣。如果流動相不均勻,可以考慮用手搖動使混合均勻或使用低粘度的溶劑。
3. 流通池被污染或有氣體
原因:流通池被污染或含有氣體可能導致噪音基線。
解決方法:用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池。如有需要,可以用1N的硝酸清洗,但不能使用鹽酸。
4. 檢測器出口阻塞
原因:檢測器出口阻塞可能導致流通池窗口破裂,產生噪音基線。
解決方法:取出阻塞物或更換管子。同時,應定期檢查流動相組成及流速,以避免此類問題的發生。
5. 流動相配比不當或流速變化
原因:流動相配比不當或流速變化可能導致基線波動。
解決方法:更改配比或流速。為避免這個問題,可以定期檢查流動相組成及流速。
6. 柱平衡慢
原因:特別是流動相發生變化時,柱平衡慢可能導致基線波動。
解決方法:用中等強度的溶劑進行沖洗。在分析前用10-20倍體積的新流動相 對柱子進行沖洗。
7. 流動相污染、變質或由低品質溶劑配成
原因:流動相污染、變質或由低品質溶劑配成可能導致基線波動。
解決方法:檢查流動相的組成。使用高品質的化學試劑及HPLC級的溶劑。如果流動相不兼容,應選擇互溶的流動相。
8. 樣品中有強保留的物質
原因:樣品中含有強保留的物質可能導致基線逐步升高。
解決方法:使用保護柱。如有必要,在進樣之間或在分析過程中,定期用強溶劑沖洗柱子。
9. 使用循環溶劑,但檢測器未調整
原因:使用循環溶劑可能導致基線波動。
解決方法:重新設定基線。當檢測器動力學范圍發生變化時,使用新的流動相。
10. 檢測器沒有設定在最大吸收波長處
原因:檢測器沒有設定在最大吸收波長處可能導致基線波動。
解決方法:將波長調整至最大吸收波長處。
基線噪音(規則的)
1. 流動相、檢測器或泵中有空氣
原因:流動相脫氣。沖洗系統以除去檢測器或泵中的空氣。
2. 流動相混合不全
原因:用手搖動使混合均勻或使用低粘度的溶劑。
3. 溫度影響
原因:柱溫過高或檢測器未加熱可能導致基線波動。
解決方法:減少差異或加上熱交換器。
4. 同一條線上有其他電子設備
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